外泌体基本参数
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外泌体企业商机

所有真核细胞类型包括造血细胞、上皮细胞、神经细胞、干细胞、脂肪细胞和病症细胞均可在培养条件下分泌外泌体。体内所有体液,包括血液、唾液、脑脊液、腹水,甚至尿液中都可以分离得到外泌体。这些外泌体传输多种信号分子,包括蛋白质、信使核糖核酸(mRNA)和非编码核糖核酸(RNA),其携带的分子可以被其他细胞吸收。因此,外泌体可以将生物信息转移到相邻细胞。这种细胞间通信不只涉及生理功能,还涉及一些疾病的发病机理,包括瘤、心血管疾病和神经退行性疾病等。外泌体由细胞分泌释放出来,在血液等体液内传播,然后又可被其他细胞吞噬,是细胞间通讯的重要介质。湖南胸水外泌体small RNA测序

Pascucci等将包含有紫杉醇的间充质细胞来源外泌体与胰腺ai细胞共培养,发现装载紫杉醇的间充质细胞外泌体具有很强的抗中流增殖效果。Tian等为降低免疫原性与毒性,采用小鼠未成熟树突状细胞所产生外泌体作为药物载体。同时为实现外泌体运输的靶向性,使细胞表达能够识别乳腺ai细胞的外泌体膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶体相关膜蛋白2)。并采用电穿孔的方法,在纯化所得的小鼠未成熟树突状细胞外泌体中载入阿霉素。结果表明该外泌体能够特异性的将阿霉素传递给中流组织,抑制中流生长且无明显毒性。体液外泌体透射电镜检测蔗糖密度梯度离心法根据不同物质密度分离外泌体,所获得外泌体纯度较高,但耗时、产量低。

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍,通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后,10000xg离心1h,可将直径在30-150nm之间,且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体,为了进一步纯化胎盘相关外泌体,将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后,加入非线性蔗糖密度梯度层,10000xg超速离心5h,将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证,确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。

小鼠骨髓树突状细胞产生的外泌体中含有的中流多肽能够启动特异性细胞毒性T淋巴细胞,根除或抑制小鼠中流的生长,这一发现为中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,树突状细胞来源的外泌体也能够通过激huo其他免疫细胞诱导抗中流反应,从而抑制中流。B细胞分泌的外泌体包含MHCⅡ-多肽复合物,能够激huo人和小鼠抗原特异性T细胞,从而实现调节免疫响应的功能。细菌或病原体感ran的巨噬细胞外泌体能够刺激巨噬细胞和中性粒细胞分泌炎性介质,在增强机体免疫监督方面发挥重要作用。外泌体工程实验表明外泌体中的DNA和miRNA参与调节适应免疫和先天免疫反应。

外泌体研究可以指导诊治肝损伤、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝脏疾病。药物诱导肝损伤(DILI)大鼠模型中,尿外泌体中的蛋白含量减少,包括CD26、CD81和其他潜在的标志物蛋白。而另一项研究则发现DILI大鼠血清中分离到的外泌体含有更高水平的蛋白,如HSP70、HSP90等。MSCs来源的外泌体可以诱导肝细胞增殖相关基因表达,减弱CCL4诱导的肝损伤。而酒精刺激会促进外泌体的分泌,miRNAs水平也会升高,并促进细胞因子的分泌,唤醒单核细胞的分化。尽管已取得上述成果,我们对外泌体的研究尚不够深入,外泌体在肝脏生理和病理中的重要作用及其临床应用仍有待继续探索。外泌体特主要来源于细胞内多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。河南腹膜透析液外泌体WB

外泌体有望成为临床检测的新型疾病生物标记。湖南胸水外泌体small RNA测序

通过改变外泌体的溶解性或者分散性, 可以将它们从体液或细胞培养液中沉淀出来。常见的方法是使用聚乙二醇或凝集素来沉淀样品中的外泌体。聚乙二醇是一种水溶性非离子化合物, 不含水的聚乙二醇可以通过“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂质分子的相互结合力, 从而迫使其脱离溶液, 进而在低速离心条件下发生沉降。凝集素是一种具有高度特异性的碳水化合物结合蛋白, 可通过与外泌体质膜糖蛋白上的糖链结合来改变外泌体的溶解性。此外, 还可使用鱼精蛋白、醋酸钠、有机溶剂沉淀等方法进行沉淀分离。湖南胸水外泌体small RNA测序

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