细胞分泌外泌体的过程一般分为三个阶段: (1) 质膜内陷, 形成早期内吞小泡; (2) 内吞小泡向内萌发成熟, 形成多囊泡体; (3) 多囊泡体与质膜融合, 并释放出囊泡内容物, 形成外泌体。外泌体具有独特的理化性质, 其密度为1.13~1.19 g/mL, 由平均厚度小于5 nm的双层脂膜所包裹, 具有典型杯状形态, 呈现为扁平球形。外泌体表面富含多糖链, 其质膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、神经酰胺和鞘磷脂构成, 另有与细胞来源相关的部分特殊脂类。外泌体可携带蛋白质、核酸和脂质等生物活性大分子, 其中主要为蛋白质, 且大部分蛋白为所有来源外泌体所共有, 只有小部分与其来源有关, 为其分泌细胞的特有蛋白, 能够反映分泌细胞的类型和生理病理状态。除此之外, 外泌体可携带大量mRNA和miRNA等核酸, 并将其运输到靶细胞, 发挥相应的生物学功能。双层囊膜结构（茶托状）是外泌体重要标志之一，但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。河南外泌体wb检测
血清中的miR-122和miR-145非常不稳定, 将血清在4 °C短期保存期间即发生降解, 这可能是由外泌体的异质性所导致的。–80 °C保存被公认是保存各种生物标本如尿、牛奶、血液和支气管肺泡灌洗液适宜的保存环境, 虽然这样保存血浆可能产生含有大量“污染物”的外泌体。4 °C保存虽然容易导致外泌体中蛋白和核酸的损失, 但却能够避免冻融过程造成的囊泡破坏。外泌体虽然建议保存于-80 °C环境下, 但在处理或运输过程中有时很难维持这种低温条件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一种冻干法以保存外泌体, 在冷冻过程中使用海藻糖作为保护剂, 海藻糖可以提供生物保护作用, 如稳定蛋白质、细胞膜和脂质体; 减少冷冻过程中冰的形成; 防止蛋白质以及外泌体的聚集; 减少分离和保存过程中细胞外囊泡的损失等。黑龙江植物根组织外泌体鉴定可采取通过Nanosight 可视型纳米颗粒分析仪确定外泌体颗粒数。
在血液和大多数体液（如尿液、脑脊液、唾液、胸腹腔积液、羊水和乳汁等）中均可检测到外泌体。血液外泌体的检测通常采用EDTA抗凝血分离的血浆，miRNA等一些微小RNA则采用血清样本。泌尿系统中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs，但外泌体外膜则可帮助RNA免于被降解，因此研究尿液外泌体miRNAs更具有应用价值。相较于血清中相关miRNA的水平，脑脊液外泌体中的miR-21可作为胶质瘤诊断和预后的指标，特别对预测中流复发或转移具有价值。唾液样本在安静状态下主要来源于舌下腺和颌下腺，刺激状态下则主要来源于腮腺。
外泌体可以由体内或体外培养的几乎所有类型的细胞分泌, 并广fan存在于血浆、胆汁、尿液、母乳、唾液、胸腔积液、淋巴、胃酸、支气管肺泡灌洗液、脑脊液、眼泪、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宫抽吸物液体等体液中。目前, 基于不同的分离原理, 研究者建立了五种主要的提取纯化技术, 分别为基于质量密度的超速离心技术、基于粒径大小的分离技术、基于溶解性质的聚合物沉淀技术、基于免疫亲和原理的分离技术和基于流体性质的微流控技术。精ye经过长达30年的–80 °C冷冻保存, 其外泌体的形状、物理性质、 核酸蛋白含量和种类都无明显变化。
除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分离出来的外泌体含有中流细胞特异性的mRNA，而被爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感ran的细胞分泌的外泌体中也含有EBV的潜伏期mRNA。因而，外泌体的这种运载mRNA的能力引起了中流研究者们的注意。近期，Saydam等率先报道了利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染，使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP，其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处，并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神经鞘瘤的增长被明显抑制。外泌体的复杂性，为疾病检测和监测提供了一个多指标的诊断窗口。安徽水果外泌体分离
外泌体由于包含的内容物具有明显的组织特异性，为其能成为瘤早期诊断的生物标志物提供了重要保障。河南外泌体wb检测
通过对28例前列腺ai症患者和19例正常人尿液外泌体中的miRNA进行深度测序分析，发现两种miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者组明显下调，表明尿液外泌体中的特异性miRNA可能作为前列腺ai的新型生物标志物。Khurana等［100］将研究对象由miRNAs扩大至多种类型RNA，通过对慢性肾病患者尿液外泌体中各类RNA进行系统研究，在慢性肾病患者组中识别出30种明显差异的lncRNAs，表明尿液外泌体中的lncRNAs具有作为慢性肾病早期诊断标志物的潜力。Skotland等的研究则表明尿液外泌体中的脂质能够作为前列腺ai的新型标志物，3种脂质标志物结合使用能够有效提高对前列腺ai的诊断灵敏度(93%)和特异性(100%)。河南外泌体wb检测
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