电穿孔法时外泌体载药的方法的一种,因参数容易控制,多种药物载入外泌体都可以使用该方法。Wang等人研究了胞外囊泡作为小RNA的靶向递送系统,利用电穿孔法将siRNA/microRNA载入核酸适配体AS1411(AS1411是一种靶向中流细胞高表达核仁素的核酸适配体)修饰的囊泡中,然后通过外泌体将siRNA/microRNA靶向递送到乳腺ai组织。由于AS1411和核仁素的的结合达到瘤靶向(核仁素在乳腺ai细胞表面高表达),这种靶向let-7miRNA的囊泡可在体外传递到人乳腺aiMDA-MB-231细胞。静脉注射载有Cy5荧光标记的miRNAlet-7的AS1411囊泡,可以选择性靶向荷瘤小鼠中的中流部位,并抑制中流的生长,而且修饰的囊泡耐受性良好,没有显示明显的非特异性副作用或免疫应答反应。外泌体作为内源性的天然纳米材料,在药物的递送中有着独特的优势。江西外泌体载药纳米的制备方法
传统药物往往存在水溶性差、易被人体快速qing除、生物相容性差、体内分布不理想和向细胞渗透能力低等缺陷,这些问题在一定程度上限制了它们的临床应用。药物投递系统就是要解决上述一个或多个问题以达到增加药物的安全性和效果的目的。在外泌体载药中,外泌体作为药物载体进行药物运输有独特的优势,主要体现在:(1)当使用自源外泌体时,外泌体引起的有害免疫反应极低;(2)外泌体在人血液中的稳定性好;(3)向细胞转运“货物”的效率高;(4)外泌体运载药物时句有一定的靶向性;(5)外泌体直径在40~100nm之间,因此可以很好地利用增强渗透滞留(EPR)效应,有选择性地渗入到中流或者炎症组织部位。山东细胞外泌体载药实验参考价格装载了连翘酯苷A(FTA)的A549来源的外泌体无论是4℃还是37℃在1周内可以稳定存在。
休眠性乳腺ai细胞会促使间充质干细胞(MSCs)释放含有不同miRNA(如miR-222/223)的外泌体,从而促进一部分ai细胞处于静止期,并赋予抗药性。有研究发现,间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)能够通过递送miRNA-142-3p抑制剂在体外和体内降低乳腺ai的致瘤性。在体外,MSC-Exo可有效递送miR-142-3p抑制剂,降低miR-142-3p和miR-150水平,增加调控靶基因APC和P2X7R的转录。在体内,MSC-Exo能够将抑制性寡核苷酸递送到中流组织中以下调miR-142-3p和miR-150的表达水平。此外,MSC-Exo递送的miR-100能够通过调节乳腺ai细胞中mTOR/HIF-1α/VEGF信号轴,抑制体外血管生成,从而影响乳腺ai细胞的行为。
静脉注射修饰RVG神经元靶向肽的外泌体能透过血脑屏障,用于阿尔茨海默症的zhiliao。Alaarez-Erviti等通过基因工程技术使DC细胞分泌的外泌体膜上连接一个特异性RVG神经元靶向肽,从而使包载siRNA的外泌体顺利地靶向到脑中特定的神经细胞。研究结果显示,负载siRNA的RVG-EXOs可以使阿尔茨海默症相关BACE1mRNA下调61%,蛋白表达下调62%,明显降低β-淀粉样肽1-42水平。之后,COOper等利用相同的技术递送α-突触核dan白siRNA到转基因模型鼠中,致使大鼠中脑、纹状体、皮质层区域mRNA水平分别下调49%、56%、50%,相应的α-突触核dan白水平下调32%、26%、30%,而且能有效地抑制中脑区域α-突触核dan白的聚集,展示了外泌体用于脑部疾病zhiliao的巨大潜力。包载厚朴酚的外泌体比游离厚朴酚有更高的zhiliao功效,可改善细胞摄取从而提高抗中流功效。
外泌体作为纳米级内源性载体囊泡,具有低免疫原性,可以利用天然独特的来源透过细胞屏障;为球形空心结构,不需要设计结构而装载药物;为细胞间通信介质而用于递送药物;对外泌体修饰可获得靶向性,提高药物递送的效率。但外泌体产量一直比较低,已有研究基于Fe2O3与聚乳酸⁃乙醇酸共聚物的生物可降解纳米颗粒(NPs)提高外泌体产量,用LPS刺激THP-1巨噬细胞也会增加外泌体产量。由于外泌体的得率较低,载药时应考虑药物性质选择合适的载yao方法,以达到外泌体的合理运用。外泌体具有对自身中流的靶向能力,作为载体传递药物可以增加中流部位的药物浓度。福建细胞样本外泌体载药实验服务
树突细胞分泌的外泌体表面会表达出CD9,有利于加强外泌体与靶细胞的融合,提高外泌体对药物运输的效率。江西外泌体载药纳米的制备方法
间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)在外泌体载药中作为药物递送的载体具有独特优势。目前临床上普遍使用MSCs的原代细胞,虽然其可以产生大量的外泌体,但是对于大规模生产来说,它的增殖能力有限,产生的外泌体可能具有批次间的差异。Chen等人发现,使用c-myc转染人胚胎干细胞衍生的间充质干细胞(hESC-MSC),能够在不影响外泌体生产质量的前提下,提高MSCs的增殖率,缩短生产时间。转染的hESC-MSC能够供应毫克范围内的外泌体,为生产具有生物学效益的外泌体提供了一定的可行性。此外,还可以对外泌体进行功能化修饰,进一步增强外泌体的作用优势。外泌体的功能化修饰能够延长外泌体的循环时间、增强外泌体在细胞质的递送效率和促使外泌体具有更强的靶向性。江西外泌体载药纳米的制备方法
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