自噬基本参数
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自噬企业商机

自噬发生过程:在此过程中,自噬体的形成是关键,其直径一般为300~900nm,平均500nm,囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、过氧化物酶体等。与其他细胞器相比,自噬体的半衰期比较短,只有8min左右,说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。在整个自体吞噬过程中,细胞质和细胞器都受到破坏,较明显的是线粒体和内质网受损。虽然自体吞噬并不直接破坏细胞膜和细胞核,但是有证据表明,在较初断裂或消化后,细胞膜和细胞核会较终变成溶酶体以消化和分解自身。白藜芦醇可诱导H9c2细胞自噬,其通路可能与激huo的p38MAPK相关。青岛细胞自噬整体实验

有学者考察了三氧化2砷(ATO)对体内和体外胶质瘤细胞U118-MG的作用,研究发现ATO可通过下调中流组织中存活素的量诱导U118-MG细胞自噬和凋亡,从而发挥抑制中流的作用,其作用抑制与PI3K/Akt通路和激huoMAPK通路相关。DHA还可诱导食管aiEca109和Ec9706细胞LC3-I向LC3-II转变,并且发生细胞凋亡。和厚朴酚可剂量依赖性抑制多形性胶质母细胞DBTRG-05MG细胞活力,诱导DBTRG-05MG细胞自噬和凋亡。槲皮素诱导人神经胶质瘤细胞株U373-MG发生线粒体介导的自噬,诱导LC3-I向LC3-II转化。另外,汉黄芩黄素通过抑制mTOR/P70S6K通路诱导人鼻咽ai自噬,且诱导细胞凋亡。河南单荧光自噬慢病毒锦灯笼的有效成分酸浆苦素A可上调Beclin-1、LC3蛋白表达诱导黑色素中流细胞A375-S2自噬。

当自噬体与溶酶体融合后,形成自噬溶酶体。自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡,作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。这种溶酶体普遍存在于正常的细胞内,在细胞内起“清道夫”作用,作为细胞内细胞器和其它结构自然减员和更新的正常途径。在组织细胞受到各种理化因素伤害时,自噬性溶酶体大量增加的,因此对细胞的损伤起一种保护作用。自噬性溶酶体的作用底物是内源性的,即来自细胞内的衰老和崩解的细胞器或局部细胞质等。它们由单层膜包围,内部常含有尚未分解的内质网、线粒体和高尔基复合体或脂类、糖原等。正常细胞中的自噬性溶酶体在消化、分解、自然更替一些细胞内的结构上起着重要作用。当细胞受到药物作用、射线照射和机械损伤时,其数量明显地增多。在病变的细胞中也常可见到自噬性溶酶体。自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡,作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。

防己诺林碱是中药粉防己的有效成分之一,1×10-3~1×103 mmol/L的防己诺林碱可激huop53/sestrin2/AMPK通路,诱导HepG2和PLC/PRF/5细胞自噬性死亡,但不诱导细胞凋亡;抑制AMPK通路和干扰Atg5基因后,可削弱防己诺林碱的上述作用,提示防己诺林碱诱导细胞自噬的作用机制可能与激huop53/sestrin2/AMPK通路相关。火麻仁的成分大ma酰B也可通过抑制Akt/mTOR通路诱导HepG2细胞自噬性死亡。另外,姜黄素和阿霉素联合用药后,可诱导HepG2细胞自噬,上调LC3-II的量,提高LC3标记的自体吞噬体和自噬性溶酶体的表达,同时诱导凋亡,也提示联合用药防治肝ai的有效性。APP是Aβ的前体蛋白, 形态学和功能研究均已证实APP是自噬性降解的底物。

细胞经诱导或阻止后,需对自噬过程进行观察和检测,常用的策略和技术有:观察自噬体的形成。由于自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下看不到,因此,直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为:新月状或杯状,双层或多层膜,有包绕胞浆成分的趋势。自噬体(AV1)的特征为:双层或多层膜的液泡状结构,内含胞浆成分,如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体(AV2)的特征为:单层膜,胞浆成分已降解。我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的看出自噬流的强弱。在自噬过程中,通过压力诱导自噬后,细胞质物质被自噬体的双膜结构隔离。河南单荧光自噬慢病毒

白藜芦醇通过诱导自噬途径抑制PrP(106~126)介导的神经SH-SY5Y细胞凋亡和线粒体功能障碍。青岛细胞自噬整体实验

有研究表明,一种携带TSLC1抑病基因的溶瘤腺病毒可靶向Wnt信号通路使瘤细胞发生细胞自噬、凋亡等从而抑制瘤生长,可延长小鼠模型的生存期,该研究则从基因层面调控了瘤代谢。自噬在肝病的发生的发展中发挥重要作用,但其影响呈双面性。自噬的诱导和抑制在肝病免疫治理中均取得了一定进展,但其作用机制并不完全明确,取决于很多因素,可能和肝病的分化、病程分期等有关。并且,自噬的调控机制在肝病发生的发展的不同阶段可能起到不同的作用,如何调控自噬,减少肝病发生,并且促进细胞进入自噬死亡程序,已经成为瘤预防和治理研究的新热点。青岛细胞自噬整体实验

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