Caveolin-1(cav1)是称为细胞膜穴样内陷的质膜内陷的重要结构和信号成分，在脂肪细胞中含量丰富。正如之前报道的那样，cav1基因（ad-cav1敲除[KO]小鼠）的脂肪细胞特异性消融不会导致蛋白质的消除，因为cav1蛋白质从邻近的内皮细胞转移到脂肪细胞。然而，这是小鼠功能性KO，因为脂肪细胞小窝结构已耗尽。与对照组相比，尽管葡萄糖刺激的胰岛素分泌完全丧失、代谢组织中胰岛素刺激的AKT激huo减弱以及部分脂肪代谢障碍，但采用高脂肪饮食(HFD)的ad-cav1KO小鼠显示出全身葡萄糖清chu率有所改善。原因是白色脂肪组织(AT)增加了不依赖胰岛素的葡萄糖摄取和减少了肝糖异生。此外，HFD喂养的ad-cav1KO小鼠表现出明显的AT炎症、纤维化、线粒体功能障碍和脂质代谢失调。ad-cav1KO小鼠的葡萄糖清chu表型至少部分由AT外泌体(AT-sEV)介导。向对照小鼠注射来自ad-cav1KO小鼠的AT-sEV表型复制ad-cav1KO特征。有趣的是，来自ad-cav1KO小鼠的AT-sEV将AT的表型传播到肝脏。这些数据表明，ad-cav1对于AT健康适应营养过剩至关重要，并防止外泌体将负性表型异常传播到其他organ。 对分离的外泌体进行体外标记或货梯示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。山东植物外泌体western blot
将mRNA包装到细胞外泌体中虽然细胞外泌体正在成为一种有前途的递送系统，但事实证明，将诊疗货物有效地装载到细胞外泌体中具有挑战性。细胞外泌体可以在生物发生过程中或在使用物理或化学方法分离细胞外泌体后自然加载。电穿孔已用于将核酸加载到细胞外泌体中，但是，这会破坏细胞外泌体膜的内在特性并导致大量细胞外泌体损失。因此，将mRNA加载到细胞外泌体中的醉常见方法是用编码诊疗性mRNA的质粒转染细胞外泌体生产细胞。由此产生的高浓度细胞质mRNA足以将mRNA包装到细胞外泌体中，这可能是因为已经发现细胞外泌体可以功能性地输出大量过剩的细胞成分。福建外泌体NTA外泌体及其携带的组分参与肝脏细胞的增殖、再生和迁移等生理过程，在肝脏疾病和肝损伤中起着重要作用。
从体液中高精度分离小细胞外囊泡 (sEV) 对于开发下一代液体活检和再生疗法至关重要。然而，目前的 sEV 分离方法需要专门的设备和耗时的协议，并且难以产生高纯度的 sEV 亚群。在这里，我们介绍了通过波柱激发共振 (ANSWER) 进行的声学纳米级分离，它允许单步、快速（<10 分钟）、高纯度（>96% 小外泌体，>80% 外泌体）分离来自无需任何样品预处理的体液样品。粒子通过激发共振以尺寸选择性的方式迭代偏转。这种以前未发现的现象使用表面声波在流体中产生虚拟的、可调谐的柱状声场模式。无需样品预处理或复杂纳米制造方法的高精度 sEV 分离已使用 ANSWER 进行了证明，显示出作为强大工具的潜力，可以对 sEV 亚群的复杂性、异质性和功能进行更深入的研究。
如外泌体加载的miRNA通讯通路的存在所证明的那样，对于其他RNA类型，miRNA似乎优先加载到外泌体中，表明细胞内存在内源加载系统。AGO2是一种RNA结合蛋白，可结合miRNA，可能负责外泌体中的miRNA加载。由于它们在外泌体中具有深远的调节潜力和天然存在性，miRNA和AGO2结合小发夹RNA(shRNA)似乎是外泌体诊疗的理想候选者。在外泌体中观察到的另一类调节RNA是环状RNA(circRNA)。CircRNA是一类单链环状非编码RNA，已观察到一些基因表达的circRNA数量是蛋白质编码mRNA的数倍，表明其具有重要的功能作用，包括通过吸收miRNA进行转录调节、与蛋白质相互作用、与pre-mRNA剪接竞争，以及很少作为模板用于蛋白质翻译。缺少5'和3'末端可保护circRNA免于被核酸外切酶降解，这醉终使这些转录本在细胞质中的寿命比其他RNA更长。醉近，发现功能性circRNA被外泌体加载并转移到受体细胞中。外泌体中的circRNA和线性RNA之间的比率高于生产细胞，表明内源性分选机制。由于它们增加的稳定性，circRNA可以被包装到外泌体中并转移到靶细胞，在那里它们可以比典型的mRNA更长时间地支持蛋白质翻译。值得注意的是，circRNA可以设计为具有内部核糖体进入位点(IRES)以表达感兴趣的蛋白质。外泌形态呈现多样性，有研究将其分为9个类别。
在真核生物中，泛素-蛋白酶体系统(UPS)和自噬-溶酶体途径(ALP)对于维持细胞蛋白稳态至关重要并与CA进展相关。我们之前的研究表明，磷酸酶和张力蛋白同系物(PTEN)是人类CA中醉常见的突变基因之一，它限制了蛋白酶体的丰度，并决定了胆管ai(CCA)中蛋白酶体抑制剂的化学敏感性。然而，PTEN是否调节溶酶体通路仍不清楚。我们在CCA细胞系中使用功能丧失和功能获得策略测试了PTEN对溶酶体生物发生和外泌体分泌的影响。使用体外去磷酸化测定，我们探索了PTEN与溶酶体生物发生的关键调节因子转录因子EB(TFEB)之间的调节机制。使用迁移试验、侵袭试验和经脾肝转移小鼠模型，我们评估了PTEN缺陷、TFEB介导的溶酶体生物发生和外泌体分泌对tumour转移的作用。此外，我们通过回顾性分析研究了PTEN表达和外泌体分泌的临床意义。PTEN通过其蛋白磷酸酶活性使TFEB在Ser211位点去磷酸化，从而促进溶酶体生物发生和酸化。值得注意的是，PTEN缺乏通过减少溶酶体介导的多泡体(MVB)降解来增加外泌体分泌，这进一步促进了CCA的增殖和侵袭。TFEB激动剂姜黄素类似物C1抑制了小鼠模型中PTEN缺陷引起的转移表型，我们强调了临床队列中PTEN缺陷与外泌体分泌之间的相关性。在CCA中。 外泌体本身的惰性相当高，但它们与细胞膜融合可将所携带的物质和信号传递到受体细胞并改变其生物学功能。北京植物组织外泌体
树突状细胞来源的外泌体可有效诱导对寄生虫和弓形虫的保护性体液和细胞免疫应答。山东植物外泌体western blot
缺氧已被证明会诱导细胞外囊泡(EV)的释放，并对EV的组成和功能产生影响。缺氧EV可增强内皮细胞的存活和血管生成能力，在免疫细胞中具有kang炎作用，并通过改变浸润性单核细胞和巨噬细胞的免疫代谢特征来促进tumour进展和侵袭。miR-21-5p是EV中醉常报道的缺氧诱导的microRNA(miRNA)。载有miR-21-5p的EV与转移呈正相关，促进内皮细胞的血管生成，并已被证明可以增加ai细胞的迁移、扩张和侵袭。在几项研究中，缺氧显示以缺氧诱导因子-α(HIFα)依赖性方式增加EV中miR-21-5p的水平，并且这些EV与受体的kang炎和抗细胞凋亡作用相关细胞。EVs调节受体细胞功能的能力使EVs成为诊治性诊治的有吸引力的候选者，并且从生物流体中检测背景特定EV货物改变的可能性支持它们作为生物标志物的潜力。 山东植物外泌体western blot
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