美国药典(USP)对宿主细胞残留DNA检测的规定:美国食品药品监督管理局(FDA)发布的指导原则中指出生物制品宿主细胞DNA残余限度不得超过100pg/剂量,对于大剂量的如单克隆抗体的生物制品,根据其残余DNA来源及给药途径,DNA残留量可放宽至10ng/剂量。《美国药典》(USP40-NF35)通则<1130>收录了3种外源性DNA残留量测定的方法,分别为DNA探针杂交法、阈值法和实时定量聚合酶链式反应(PCR)法。
欧洲药典(EP)对宿主细胞残留DNA检测的规定:欧洲药品管理局指出需要对连续传代哺乳细胞残留DNA的去除过程进行工艺验证,旨在确认去除残留DNA的主要步骤,并确保此工艺程序可以将终产品中的残留DNA控制在允许范围[4]。《欧洲药典》(EP9.3)通则规定的生物制品残留DNA限度大多为不超过10ng/剂量,但对个别疫苗的残留DNA限定标准更严格,如甲型肝炎灭活疫苗中的残留DNA不得超过100pg/剂量,乙型肝炎疫苗中的DNA残留量不得超过10pg/剂量。 宿主细胞残留DNA检测整体解决方案。广州HEK293T细胞残留DNA检测服务
用qPCR进行宿主细胞残留DNA检测时,哪些因素会对检测结果准确性和方法灵敏度存在较大影响?参考品DNA量值溯源及质量保证:参考品DNA的量值准确与否,直接关系到样品检测结果的准确性,因此需制定完善的参考品量值溯源程序,确保结果准确可靠。参考品DNA的质量要求可从条带大小、完整性、纯度、浓度等方面做多面评估,细胞来源的参考品应考察支原体污染,质粒参考品应考察质粒宿主E.coli基因组DNA残留情况等,尽量排除干扰确保结果准确可靠。杭州E.coli残留DNA检测CHO宿主细胞残留DNA检测的质量控制。
南京正扬生物科技有限公司自主研发生产了一款E.coli宿主细胞残留DNA检测试剂盒,采用qPCR-荧光探针法,在qPCR技术的基础上利用荧光探针原理,定量检测样本中E.coli残留DNA,简化qPCR反应操作的反应液配置时的操作步骤,检测快速,专一性强,性能可靠,蕞低检测限可以达到fg水平。实验操作步骤包括标准品稀释、样品前处理、样品DNA提取纯化、PCR试剂配制及加样、PCR扩增检测、实验数据分析。
宿主细胞残留DNA检测过程中,标准品稀释环节有哪些注意事项?①用来做稀释的耗材建议使用1.5mL离心管,容量太大的耗材会增加DNA的吸附作用,容量太小易导致混匀不充分。②为了做出更好的线性,进行倍数稀释的时候要吸取较大体积标准品溶液(避免用1μL标准品+9μL稀释液这样的小体积体系进行稀释)。③每进行一步稀释都要进行充分的混匀,在点样前也要进行混匀。④为了提高准确性,每个浓度建议做3个复孔。
冻干人用狂犬病疫苗以其在生产工艺、经济效益和质量等方面的综合优势,占据了我国的大部分狂犬病疫苗市场。目前,人用狂犬病疫苗的生产需要经过Vero细胞培养、病毒增殖、病毒收获和浓缩、病毒灭活以及纯化等过程。然而,在细胞培养和病毒增殖的过程中,会产生游离的宿主DNA及与病毒蛋白结合的宿主DNA。这些残留DNA会随疫苗一起被注入到人体内,使得人体由于异源物质的注入引起不良反应。鉴于上述风险,国内外监管部门分别出台了相应的指导原则并提供了宿主细胞残留DNA检测的方法。哪些公司有Ecoli宿主细胞残留DNA检测试剂盒?
宿主细胞残留DNA检测:南京正扬生科科技有限公司自主研发的CHO宿主细胞残留DNA检测试剂盒的优点有哪些?①试剂盒经过独特的设计开发,可以防止PCR产物污染;②产品检测灵敏度高,定量限可低至1fg/μL;③试剂盒检测准确度高,试剂盒配套定量参考品,且定量参考品均溯源至国家标准品,每批试剂质检时均会与国家标准品对标,保证检测结果的准确性;④试剂盒稳定性好,PCR检测试剂盒在常温储存一周、反复冻融10次,产品性能仍满足要求;哪些公司的HEK293宿主细胞残留DNA检测试剂盒好?郑州残留DNA检测产品
国家对毕赤酵母宿主细胞残留DNA检测的要求有哪些?广州HEK293T细胞残留DNA检测服务
实时荧光定量PCR法宿主细胞残留DNA检测的原理和方法:实时荧光定量PCR是基于PCR扩增时,在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,产物的增加可以通过荧光信号指示,通过实时监控PCR体系中的荧光信号,对样本中初始模板进行定量分析。实时荧光定量PCR可实时检测产物的生成量,通过加入已知浓度的标准样品绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度,从而达到检测宿主细胞残留DNA含量的目的。
为什么要做宿主细胞残留DNA检测?众所周知,大部分生物制剂是不经过胃肠道直接进入体内,所以除了生物活性外,相关部门对药品中杂质的含量要求非常严格。其中,宿主细胞残留DNA因为具有特别的潜在安全风险,一直是监管机构关注的重点。生物制品中的重组蛋白药、抗体药、疫苗等产品是用连续传代的动物细胞株表达生产,虽然经过严格的纯化工艺,但产品中仍有可能残余宿主细胞DNA。这些残余DNA可能带来传染性或致瘤性风险,比如残留DNA可能携带HIV病毒或Ras ai基因。 广州HEK293T细胞残留DNA检测服务
宿主细胞残留DNA检测数据分析环节报错信息中的NOSIGNAL什么含义怎么解决?NOSIGNAL:这...
【详情】荧光探针法用于宿主细胞残留DNA检测的原理是:选择只能染色双链DNA的特异性荧光染料,染料与双链DN...
【详情】南京正扬生物科技有限公司的E.coli残留DNA检测试剂盒,基于TaqMan荧光探针法qPCR原理,...
【详情】宿主细胞残留DNA检测数据分析环节报错信息中的EXPFAIL什么含义怎么解决?EXPFAIL:表示指...
【详情】在做宿主细胞残留DNA检测实验的时候加标对照组是必须要做的一个对照组,可根据后加标对照组的结果计算加...
【详情】在生物制品的研发与生产过程中,宿主细胞残留DNA是影响其纯度与安全性的关键因素之一,宿主细胞残留DN...
【详情】使用南京正扬生物科技有限公的宿主细胞残留DNA检测试剂盒的注意事项有哪些?1、在收到试剂盒的时候一定...
【详情】由于宿主细胞残留DNA具有严重的潜在风险,所以为确保生物制品的安全性和质量,因此建立合适的宿主细胞残...
【详情】宿主细胞残留DNA检测数据分析环节报错信息中的THOLDFAIL什么含义怎么解决?THOLDFAIL...
【详情】宿主细胞残留DNA检测实验中数据分析环节,报错信息中的BADROX是什么含义怎么解决?BADROX:...
【详情】南京正扬生物科技有限公司的SV40LTA&E1A残留DNA检测试剂盒,基于TaqMan荧光探针法qP...
【详情】在宿主细胞残留DNA检测实验中容易遇到的问题有哪些?1、标曲不理想。导致标曲不理想的原因主要有试剂与...
【详情】