多聚酶链反应:多聚酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)又称体外核酸扩增技术,即对特定DNA的片段进行非细胞依赖性扩增,其基本过程是将已提取的待测DNA在一对寡核苷酸引物、三磷酸核苷及耐热DNA多聚酶存在的情况下,分别于90℃、55℃和72℃下经变性、退火和核苷酸链的延伸,如此循环数十次以扩增DNA。扩增物经溴乙锭染色后作凝胶电泳,再于紫外灯下观察特定碱基对数的DNA的片段,以出现橙红色的电泳带为阳性。若需进一步鉴定,可将凝胶分离的DNA回收再用特异性探针进行杂交分析。PCR在免疫学中通常应用于ai基因、凋亡相关基因的表达、HLA的定型与基因分析、免疫球蛋白和T细胞受体多样性研究以及细胞因子、粘附分子的检测。PCR的方法有30余种,如多重PCR、巢式PCR、二次PCR、共享引物PCR、逆转录PCR、锚定PCR等等。现临床研究蕞常用的是逆转录PCR,现简介如下:首先提取细胞总RNA,然后在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板合成cDNA,随后加入特异性引物进行扩增,再经琼脂糖电泳检测特异性的DNA,从而反映出某种基因的转录状况。微流控技术的应用可以实现实验的高度集成和自动化,提高实验的标准化和可重复性。浙江诊断平台微流控产品制作
生化诊断仪器发展历程生化分析仪从蕞开始的分光光度计到半自动生化分析仪,直至现在普遍应用的全自动生化分析仪,共经历了三个阶段。di yi代:分光光度计,是利用紫外光、可见光、红外光和激光灯测定物质的吸收光谱,利用此吸收光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法,称为分光光度法或分光光度技术,使用的仪器称为分光光度计。分光光度计检测的优点是直接读取吸光度,操作简单、价格便宜;缺点为不能直接计算浓度值,误差大,检测项目少。第二代:半自动生化分析仪,指在分析过程中的部分操作(如加样、保温、吸入比色、结果记录等某一步骤)需要手工完成,而另一部分操作则可由仪器自动完成。这类仪器的特点是体积小,结构简单,灵活性大,即可分开单独使用,又可与其他仪器配合使用,价格便宜。第三代:全自动分析仪,从加样至输出结果的全过程完全由仪器自动完成。操作者只需把样品放在分析仪的特定位置上,选用程序开动仪器即可等取检验报告。全自动生化仪比半自动试剂位、样品位多,测试速度快,不用人工加注试剂,排除了人工加试剂手法不同带来的误差,准确率重复性更好。天津驱动方式微流控产品研发微流控技术的应用可以大幅减少实验所需的样品和试剂用量,节约了成本,有利于可持续发展。
微流控驱动方式之声表面波驱动:表面声波:声波诱导固液界面的液流,导致液滴的移动。
Surface acoustic waves 表面声波特点:暴露在空气环境中的液滴放置在疏水表面上,微流体操作单元主要由声波控制的运动模块组成通过声呐实现,液滴的形成、运输和混合大多是可以自由编程的
原理:作为电湿润的替代方法,使用振幅为纳米级别的声波声波由置入电极中的压电转换芯片例如石英形成芯片疏水面的液滴可以在声波的影响下运动
操作单元测量:由疏水面的测量点完成,液滴经过测量点时一部分液体被留在测量点中进行测量混合:是SAW平台的内在操作单元在声波的影响下液体内部一直在发生循环进而混合
Surfaceacousticwaves表面声波应用PCR:由SAW、加热装置组成的PCR仪用于200nL的液滴中的DNR的PCR,为防止液滴的蒸发,在液滴表面覆一层不相溶的油滴,测量DNA的敏感性达到0.1ng
优点:能够自由的操作小的液滴更灵活,控制速度可根据液滴的表面张力调节
缺点:电极位置固定,可程控性差长期的稳定性差芯片界面制作难,费用高
di yi节检测抗原抗体的体外方法
抗原抗体反应的特点:
抗原抗体结合的特异性抗原借助表面的抗原决定簇与抗体分子超变区在空间构型上的互补,发生特异性结合。同一抗原分子可具有多种不同的抗原决定簇,若两种不同的抗原分子具有一个或多个相同的抗原决定簇,则与抗体反应时可出现交叉反应(cross reaction)。
抗原抗体结合的可逆性抗原抗体结合除以空间构型互补外,主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的非共价方式结合,结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离,回复抗原抗体的游离状态。解离后的抗原和抗体仍保持原有的性质。抗原抗体复合物解离度在很大程度上取决于特异性抗体超变区与相应抗原决定簇三维空间构型的互补程度,互补程度越高,分子间距越小,作用力越大,两者结合越牢固,不易解离;反之,则容易发生解离。 这些微流控产品经过精密加工,能够提供高质量的流体控制和精确的实验结果。
含光免疫解决方:全自动进样可控性高可使用指尖cai xue,芯片中的微通道结构高度可控,并经过特殊处理,进样量小,可实现全自动选择,无需外加压力高通量检测基于微流控表面张力驱动的免疫荧光诊断平台,可在单片芯片上实现多通道多项目联检∶如cTnl,Myo,CK-MB,BN-P,D-Dimer,lgG,IgM,IgE,CRP等项目快速检测高准确度高性价比含光开发了各种方法和专有技术,一体化精密微注塑成型芯片,结合先进包埋和多层封接技术,满足产品对性能和成本的苛刻要求。苏州含光微纳科技有限公司的微流控产品经过精密加工,能够提供高质量的实验结果和可靠的性能。江西医用微流控产品定制
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分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、zhi liao和预后具有重要意义。1.核酸分子杂交技术应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测,包括Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、点杂交、原位杂交等。2.聚合酶链反应技术聚合酶链反应技术是一种模拟体内DNA半保留复制过程,在体外酶促合成特异性DNA的片段的方法。浙江诊断平台微流控产品制作