分泌细胞因子

流式多因子检测技术(CBA) 微球免疫分析系统CBA （Cytometric Bead Array）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单 个样品中的多个指标进行检测。 CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻 松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微 球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（capture antibody ），与样本（例 如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detection antibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用 FCAP Array软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的 定性或定量。 CBA具有以下优点： 每次检测需25-50ul 样本；灵敏度可达 0.274pg/ml 时间t夬速，需 3-4小时，快速上样 可同时测定30种 蛋白，实验可重复性高 利用FCAP Array软件， 不论样本数目多少，可 快速分析完成分析 LabEx数字病理图像分析平台，为您提供病理图像分析的全套解决方案。分泌细胞因子

炎症相关的生物标志物包括: （1）肠道微生物因子： 肠道菌群可能受到饮食，益生菌，益生元，外源酶，粪便菌群移植和其他环境因素的影响 （2）免疫相关： 肠道菌群驱动炎症的扩大，细胞浸润固有层，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子，包括TNF，IL-1β，IFN- γ和IL-23 / Th17细胞途径。 （3）炎症介质： 如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子（如 IL-12, IL-23, IL-17, IL-18和TGF-β）等。Total InhibinLabEx现有MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。

LUMINEX常见问题及解答（一） 1) LUMINEX应用于哪些领域? 生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。 2) LUMINEX敏感性如何？ 灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。 3) 对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？ 血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul， 每次可以检测多个蛋白。 从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、Western Blot完全一样。 4) 一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？ 检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。 5) 如何保证检测结果的特异性？ 检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。 LabEx 提供人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、信号通路重要指标多因子组合检测。

MSD经典10因子 推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。 MSD技术－电化学发光和点阵技术 MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。 MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）, 5-25ul微量样本检测。 LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！生物标志物开发与研究。TNFRSF9

LabEx年多因子检测样本量达20w+！分泌细胞因子

抗体芯片技术服务包括： 1.样品蛋白质抽提: a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。 b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。 c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。 2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。 3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育 a.细胞因子抗体芯片封闭后加入 50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。 b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。 4.抗体芯片检测 5.提供实验报告: 包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。 您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。 分泌细胞因子

上海乐备实生物技术有限公司位于古丹路15号18号楼4楼。公司业务分为标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务等，目前不断进行创新和服务改进，为客户提供良好的产品和服务。公司将不断增强企业重点竞争力，努力学习行业知识，遵守行业规范，植根于医药健康行业的发展。在社会各界的鼎力支持下，持续创新，不断铸造***服务体验，为客户成功提供坚实有力的支持。