细胞因子检测的意义

MSD经典10因子推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。MSD技术－电化学发光和点阵技术MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量样本检测。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！LabEx 药物筛选平台：激酶抑制剂筛选，免疫检查点，GPCR，抗体药研发，蛋白互作。细胞因子检测的意义

Q：是否要用到试剂盒本身的试剂？

A：ELISA预实验要用到试剂盒的试剂，并且预实验做的样本越多，正式实验的样本可检测的就越少。

Q：ELISA实验可做波长？

A：ELISA通常是450nm，但是也有特殊实验需要其他波长。实验室可提供波长检测。光吸收：340nm/405/450/490/492/560/620nm/630nm荧光：320nm/340nm/620nm/665nm   。

Q：ELISA预实验是否要收费？

A：***次预实验不收费，第二次开始需要收取500元/次的费用每块板包含1次**预实验与1次正式实验。 蛋白质芯片的双抗体夹心法蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。

LabEx可提供的服务及优势（二）LabEx服务的优势：1、专业的抗体公司；2、先进的实验仪器平台；3、可靠、放心的结果；4、实惠、亲民的价格；5、认真、严谨的工作态度。Luminex平台服务：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种荧光免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。MSD（MesoScaleDiscovery）：将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD（MesoScaleDiscovery）是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。CBA(CytometricBeadsArray)：即细胞因子微球检测技术。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

Q：ELISA实验预实验的目的？A:确认一下样本的稀释比例，虽然试剂盒给出了一些建议，但是不同客户的样本处理方式不同，可能会出现高出标准曲线的情况，那就要预实验测试看下B、降低客户的预期，如果预实验反馈出，客户的结果在检测下限附近，可以让客户更换样本，节省试剂盒Q：ELISA实验预实验是如何安排的？A：会做整条标准曲线，比较好由客户自己挑选的有代表性的预实验样本，至少2个（高值与低值各一，各4个稀释梯度），**少耗费16个孔；若客户吝惜试剂，可只做标准曲线的两个点（比较高点和背景点，确认预实验样本的浓度是否在背景点以上或者是附近），预实验样本做几个稀释度测试（至少2个样本各3个稀释度），**少耗费8个孔；为避免样本反复冻融或正式实验样本不够，预实验样本需要另外准备；多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。elispot服务检测服务

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Q：多因子实验还用的样本类型有可些?A：Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）、FluidPeritonealFluid（腹腔液）等等。Q：多因子实验中血清好检测，还是血浆好检测?A：文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验，具体需研究者根据自己实际条件选择。Q：为什么要做预实验?A：试剂说明书中的样本稀释比例不精确，需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例，让尽可能多的因子在检测范围内，从而提高检出率。2.避免样本浓度过高，导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q：血清血聚溶血，对实验结果有形响吗?A：肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，从目前文献上看没有明确的数据支持。细胞因子检测的意义

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