王建中 临床流式细胞分析

基于luminex平台的xMAP技术：Luminex：应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点：1、既能检测蛋白，又能检测核酸2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平LabEx提供 炎症因子、趋化因子、生长因子等高通量高灵敏检测。王建中 临床流式细胞分析

LUMINEX常见问题及解答（二）6)客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义？表达差异主要取决于标本的性质和数量，我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术，检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。由此可见，两种方法应用方向有很大差别。免疫磁珠分选细胞视频本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-5,IL-6,IL-8,IL-10 种属：Non-human Primate。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。

PCRArray技术服务：PCRArray采用一种高通量的方法利用实时定量PCR聚焦信号转导、生物过程或疾病研究通路中的一组基因，无论您感兴趣的是生物标志物的发现、芯片后续研发、药物幵发、疾病鉴定PCRarray都能实现您感兴趣基因的表达分析，涵盖人、小鼠、大鼠、狗、恒河猴、猪、鸡、牛、马、兔、CHO细胞、果蝇、斑马鱼等物种的200多条信号通路，覆盖中的几乎任何基因。生命科学现象和基因之间的关系都不是孤立的，例如血管生成都有几十个或者几百个基因参与这些调控，这些基因之间存在上下游调控关系形成一张复杂的网络。我们关注某个信号通路的话就需要对整个信号通路进行比较完整的观察才能的到准确的结论。PCRArray能够同步对整个信号通路几十个乃至上百的基因进行观察，我们检测的对象包括mRNA,miRNA以及IncRNA。RNA的研究对了解基因调控、基因敲除、人类疾病防治及生物进化探索等都具有重要意义。本panel可检测以下因子：CREB (Total),CREB (Ser133) 种属：Human,Mouse,Rat。

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本panel可检测以下因子：TSH,T3,T4 种属：Rat。王建中 临床流式细胞分析

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号，构建标准曲线，还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA，特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本，许多研究人员在日常实验研究（例如动物实验、细胞实验）中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测，用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告！王建中 临床流式细胞分析

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