流式细胞分选仪的应用

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势(1)单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。流式细胞分选仪的应用

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。流式细胞分析操作方法本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-12p70,KC/GRO,TNF-α 种属：Mouse。

本panel可检测以下因子：CCL7/MCP-3/MARC,CCL21/6Ckine,CXCL16,IL-15,IL-34,IL-6R alpha,Lipocalin-2/NGAL,MMP-13,MSP/MST1,Myoglobin,Nectin-4,Oncostatin M/OSM,PDGF-DD,Proprotein Convertase 9/PCSK9,RAGE/AGER,RBP4/Retinol-Binding Protein 4,Resistin,L-Selectin/CD62L,Serpin A4/Kallistatin,SHBG,SOST/Sclerostin,SPARC,Stanniocalcin 1/STC-1,Tenascin C,TFF3,Thrombospondin-2,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TRACP/***/ACP5,TRANCE/TNFSF11/RANK L 种属：Human

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。本panel可检测以下因子：GLP-1 (total),Glucagon,Insulin 种属：Mouse。

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）Fluid、PeritonealFluid（腹腔液）等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，比较好是4的倍数，否则会造成浪费。生物标志物检测--加速推动免疫学研究进展！U-PLEX Cytokine Combo 1 (hu) 检测服务

本panel可检测以下因子：COMP,IL-18BPa,Uteroglobin 种属：Human。流式细胞分选仪的应用

1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前比较高可以达到50个左右，基因检测比较高达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。6)客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。流式细胞分选仪的应用

上海乐备实生物技术有限公司是一家从事生物科技、生物制品、医药科技领域的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务，检验技术的研发，从事货物及技术的进出口业务，化工产品及原料（除危险化学品、监控化学品、易制毒化学品）、实验室耗材与设备的销售。 【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司，是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。公司自创立以来，投身于标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务，是医药健康的主力军。乐备实生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念，影响并带动团队取得成功。乐备实生物始终关注自身，在风云变化的时代，对自身的建设毫不懈怠，高度的专注与执着使乐备实生物在行业的从容而自信。