检测细胞因子的方法

酶联免疫斑点技术（Elispot）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用，使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时，以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体，但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同，使之在体液中不断地被代谢，而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术，因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外较广的应用，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。生物标志物开发与研究。检测细胞因子的方法

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势(1)单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。分子生物标志物LabEx 免疫组化服务：包括DAB染色、HE染色、Masson染色、免疫荧光（IF）。

HALO分析平台LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！技术介绍LabEx数字病理图像分析平台，为您提供病理图像分析的全套解决方案，包括可进行高通量、全切片式的组织分析的图像分析的病理图像分析平台HALO。凭借其易用性和可扩展性，在免疫肿块物学、肿块物学、移植科学、神经科学、眼科、代谢、呼吸和病理学等领域有着较广的应用。目前HALO数字病理图像分析平台用户遍布于全球的生物制药公司、医疗和研究组织。

LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技术服务！

抗体芯片技术服务包括：1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。血清细胞因子检测意义

电化学发光，一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。检测细胞因子的方法

Q：是否要用到试剂盒本身的试剂？

A：ELISA预实验要用到试剂盒的试剂，并且预实验做的样本越多，正式实验的样本可检测的就越少。

Q：ELISA实验可做波长？

A：ELISA通常是450nm，但是也有特殊实验需要其他波长。实验室可提供波长检测。光吸收：340nm/405/450/490/492/560/620nm/630nm荧光：320nm/340nm/620nm/665nm   。

Q：ELISA预实验是否要收费？

A：***次预实验不收费，第二次开始需要收取500元/次的费用每块板包含1次**预实验与1次正式实验。 检测细胞因子的方法

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