细胞因子检测实验步骤

LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。细胞因子检测实验步骤

找到信号通路的关键节点是复杂且耗时耗力的，抗体芯片试剂盒可以在一个实验室里监测信号通路中众多关键信号组分的变化，为您节省宝贵的时间和试剂！每个试剂盒有2张玻片，每张玻片上有8或16张垫片，可同时检测达32个样本，这样可使研究者在一次实验里有充分的自由度来检测多种浓度，细胞系或时间节点的样本！抗体芯片基于夹心法ELISA原理进行设计，将众多信号通路关键节点蛋白的捕获抗体布于样品孔内做成抗体点阵，随后加入相应的识别抗体混合物，再利用两种不同的显色方式呈现结果，即化学发光法和荧光法检测！荧光流式液态芯片技术蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。

酶联免疫斑点技术（Elispot）特点：酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA)，能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行，直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质，包被上特异性的单克隆抗体，用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程，对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体，该抗体需要无毒，亲和力高等特点。)之后，在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟，培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。LabEx 药物筛选平台：激酶抑制剂筛选，免疫检查点，GPCR，抗体药研发，蛋白互作。

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势：灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。LabEx提供高通量蛋白组学（Olink）服务！生物标志物检测

MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，对于各类生物学样本的兼容度高。细胞因子检测实验步骤

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。细胞因子检测实验步骤

上海乐备实生物技术有限公司是以提供标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务为主的有限责任公司（自然），公司成立于2018-04-28，旗下LabEx，已经具有一定的业内水平。乐备实生物以标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务为主业，服务于医药健康等领域，为全国客户提供先进标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务。将凭借高精尖的系列产品与解决方案，加速推进全国医药健康产品竞争力的发展。