细胞因子实验

LUMINEX常见问题及解答（一） 1) LUMINEX应用于哪些领域? 生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。 2) LUMINEX敏感性如何？ 灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。 3) 对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？ 血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul， 每次可以检测多个蛋白。 从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、Western Blot完全一样。 4) 一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？ 检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。 5) 如何保证检测结果的特异性？ 检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。 LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因子检测服务。细胞因子实验

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。 Proprotein Convertase 9LabEx提供多音字检测服务！

流式多因子检测技术(CBA) 微球免疫分析系统CBA （Cytometric Bead Array）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单 个样品中的多个指标进行检测。 CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻 松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微 球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（capture antibody ），与样本（例 如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detection antibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用 FCAP Array软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的 定性或定量。 CBA具有以下优点： 每次检测需25-50ul 样本；灵敏度可达 0.274pg/ml 时间t夬速，需 3-4小时，快速上样 可同时测定30种 蛋白，实验可重复性高 利用FCAP Array软件， 不论样本数目多少，可 快速分析完成分析

MSD经典10因子 推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。 MSD技术－电化学发光和点阵技术 MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。 MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）, 5-25ul微量样本检测。 LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！LabEx多因子检测作为高效的检测手段，被广泛应用在多种疾病研究中。

液态流式技术(Luminex) 流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式 原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子; 具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。 基本原理： 应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用 来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。 Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对 不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多 目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。LabEx现在配备先进的实验室仪器：Luminex检测平台，流式检测平台，MSD检测平台等。1L-1F4

LabEx多因子检测技术（包括luminex、MSD等），所需样本量少，检测指标丰富。细胞因子实验

LabEx多因子检测技术－－液相悬浮技术 经典炎症十因子、高通量细胞因子初筛 液相悬浮芯片：高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于 96 孔微孔板中。进一步加 入生物素标记的高亲和配对二抗结合 SA-PE 进行信号放大，以实现对多种微量细胞因子的有效检测。利用梯度稀释的标准品检测信 号构建标准曲线，实现大量目标样本中多因子的同时检测和准确定量。 特点 1、既能检测蛋白，又能检测核酸 2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域 3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标 4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平 细胞因子实验

上海乐备实生物技术有限公司属于医药健康的高新企业，技术力量雄厚。公司是一家有限责任公司（自然）企业，以诚信务实的创业精神、专业的管理团队、踏实的职工队伍，努力为广大用户提供***的产品。公司拥有专业的技术团队，具有标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务等多项业务。乐备实生物将以真诚的服务、创新的理念、***的产品，为彼此赢得全新的未来！