流式细胞凋亡

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势(1)单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。本panel可检测以下因子：α-MSH,β-Endorphin,Neurotensin,Oxytocin,Substance P 种属：Rat,Mouse。流式细胞凋亡

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免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。

抗体芯片技术服务包括：1，样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2，蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4，抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。LabEx现在配备先进的实验室仪器：Luminex检测平台，流式检测平台，MSD检测平台等。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面，形成微阵列。V-PLEX Proinflammatory Panel 1 NHP Kit 检测服务

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肿块物（瘤类）发病机制中的细胞因子（内源性及相关功能）：Il-1（白介素1）：肿块物侵袭和血管生成所必需的IL-6（白介素6）：化学诱导的淋巴瘤所需IL-12（白介素12）：抑制化学致肿块物作用IL-15（白介素15）：促进自然杀伤T细胞白血病IFN-γ：抑制化学致肿块物作用；抑制淋巴瘤；Stat1和Rag2抑制肿块物M-CSF：促进乳腺肿块物侵袭GM-CSF：抑制淋巴瘤和肿块物TNF-α：化学诱发的皮肤肿块物所需MIF：抑制p53肿块物抑制功能TGF-β：抑制结肠肿块物Fas-Fasligand：抑制淋巴瘤发生流式细胞凋亡

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