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实验服务基本参数
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炎症相关的生物标志物包括:(1)肠道微生物因子:肠道菌群可能受到饮食,益生菌,益生元,外源酶,粪便菌群移植和其他环境因素的影响(2)免疫相关:肠道菌群驱动炎症的扩大,细胞浸润固有层,包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子,包括TNF,IL-1β,IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。(3)炎症介质:如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子(如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β)等。蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。flowjo软件可以倍性分析

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品:只需低至25μl的样品体积。高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。IL-23检测服务LabEx多因子检测作为高效的检测手段,被广泛应用在多种疾病研究中。

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点:酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。高通量蛋白组学(Olink)采用独有的 PEA,邻位延伸分析技术检测蛋白标志物。

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势:灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。LabEx提供28种抗体芯片,用于人,小鼠和大鼠物种的蛋白检测。CD20检测服务

LabEx 提供人、小鼠、大鼠:炎症反应、免疫调节、信号通路重要指标多因子组合检测。flowjo软件可以倍性分析

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。flowjo软件可以倍性分析

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