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实验服务基本参数
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实验服务企业商机

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。LabEx提供 MSD---电化学发光技术。luminex 检测服务

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。流式细胞仪分析LabEx多因子检测技术(包括luminex、MSD等),所需样本量少,检测指标丰富。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时,一束激光照射磁珠上的荧光,识别磁珠标记的捕获抗体,从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子,从而实现“定性”作用。进一步,通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体,同步识别磁珠抓取的目标细胞因子,形成“三明治”结构,并加入SA-PE偶联上生物素,通过另一束激光照射进行信号放大检测,实现“定量”作用。细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。

酶联免疫斑点技术(Elispot)技术优势(1)单细胞水平,活细胞功能检测:弥补了体液中CK半衰期短的不足,当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济,可以进行高通量筛选:既可检测自发分泌细胞,又可检测抗原特异性CK分泌细胞,具有较高特异性,并可观察药物治疗反应,且使对CSF中T、B细胞研究成为可能,对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高:在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。LabEx提供液态流式技术(Luminex)服务!ARY027检测服务

流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。luminex 检测服务

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。luminex 检测服务

上海乐备实生物技术有限公司是以提供标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务为主的有限责任公司(自然),公司位于古丹路15号18号楼4楼,成立于2018-04-28,迄今已经成长为医药健康行业内同类型企业的佼佼者。公司主要提供从事生物科技、生物制品、医药科技领域的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,检验技术的研发,从事货物及技术的进出口业务,化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、易制毒化学品)、实验室耗材与设备的销售。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】等领域内的业务,产品满意,服务可高,能够满足多方位人群或公司的需要。乐备实生物将以精良的技术、优异的产品性能和完善的售后服务,满足国内外广大客户的需求。

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