halo荧光分析

LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。LabEx MSD提供了更为便捷快速的实验流程，通常只需4-5小时，即可完成整个检测流程。halo荧光分析

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。IL-29/IFN-X1检测服务蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。

抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，对于各类生物学样本的兼容度高。

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抗体芯片介绍:ELISA原理的高通量WB，单一样品多种分析物的检测。具有微型化、集成化、高通量的特点，可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度，目前主要用于信号转导、蛋白组学、肿块物及其他疾病的相关研究。R&D的多因子固相抗体芯片•每个试剂盒可检测4个样本，每个样本可同时检测多达119个分析物，实验可在一日内完成•每个试剂盒提供4张膜，膜上监测点以复孔的形式包被捕获抗体和对照抗体•该即用型试剂盒包含抗体膜，检测抗体和缓冲液等所有组分优势和特点•使用方便，节省时间和成本•无需专门设备•高通量：1天所得到的数据相当于免疫印迹几周所得数据•样本类型多样化•每种试剂盒均验证过多种样本，如细胞裂解液，组织裂解液，细胞培养上清，血清，血浆，唾液，尿液或牛奶等•节省样本•获取相同数据点所需样本量远低于WB•比竞争对手抗体芯片所需样本量更少，获得的数据更多LabEx提供28种抗体芯片，用于人，小鼠和大鼠物种的蛋白检测相关服务,我们为您提供完整的实验结果报告，包括数据分析结果，原始数据文件，实验protocol等。halo荧光分析

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