东莞医学膜片钳技术服务

膜片钳实验中电极制备的要求：合格的膜片微电极是成功封接细胞膜的基本条件。要成功的封接细胞膜需要两方面的因素保证，一是设法造成干净的细胞膜表面，二是制成合格的电极。首先要选择适当的玻璃毛细管，其材料可使用软质玻璃（苏打玻璃、电石玻璃）或硬质玻璃（硼硅玻璃、铝硅玻璃、石英玻璃）。软玻璃电极常用于作全细胞记录，硬质玻璃因导电率低、噪声小而常用于离子单通道记录。膜片微电极是将玻璃毛细管用电极拉制仪拉制而成的，制作分三步进行：一是分两次拉制；第二步是在电极前端涂以硅酮树脂（sylgard）；第三步是抛光。全自动膜片钳系统技术指标：药液交换非常迅速，作用时间快。东莞医学膜片钳技术服务

全自动膜片钳的优势：自动化：抓取细胞、形成封接、破膜等整个实验操作全部自动化，极大的节约实验人员的时间精力。简约化：传统膜片钳所需要的显微镜、显微操作系统、微电极拉制仪，防震台、屏蔽网等全都不需要。效率高：是传统膜片钳实验效率的5-10倍。可靠性：实验结果轻松复制。经济实惠：药物消耗低，每次实验记录较低只需5μl内外液体。零技术门槛：无需膜片钳操作经验，轻松上手。高芯片封接：封接电阻可达1GΩ。确保实验可靠性。兼容性强：可与市场上大多数放大器兼容。应用范围广：除拥有传统膜片钳功能外，还可以对手动膜片钳无法涉及的亚细胞结构进行记录。扩展功能多：配套扩展设备丰富，如內灌流系统、温度控制系统、脂质体制备器等。绍兴药理学脑定位膜片钳技术全自动膜片钳系统技术指标：软件的功能全部，可按照操作者设定的参数方案自动执行实验。

膜片钳实验中电极制备之分两次拉制，首先次拉长7～10mm，直径小于200μm，在此基础上进行第二次拉制，较终使尖锐端的直径为1～2μm，两步拉制的目的主要是使电极前端的锥度变大，狭窄部长度缩短，因此可降低电极的串联电阻，也可减少全细胞记录时的电极液透析时间。由于膜片微电极较忌沾染灰尘和脏物，更忌触碰尖锐端附近部位，所以一般要求在使用前制作。抛光：将电极固定于显微镜工作台上，在镜下将尖锐端靠近加热丝，当通电加热时，可见电极尖锐端微微回缩，此时电极变得光滑，且尖锐端的杂质烧去，得到较干净的表面。从而有利于和细胞膜紧密封接，并在封接后更易保持稳定。

膜片钳使用操作流程及注意事项：1.实验结束后必须关闭实验室的水电，检查实验室门窗。2.凡是在本平台使用仪器的同学必须履行实验室相关要求，完成值日等相关工作（值日生按照实验室统一所发值日生要求履职）。3.在仪器使用以前及使用之后按按照使用时长做好登记工作。4.拉制仪提前预热（至少30min）。且用完及时关闭。电热加热线温度很高，在使用时注意避免烫伤。4.电脑里面的软件不得随意删改，不得在本机电脑下载别的软件，拷数据时需用实验室配置的U盘。5.禁止私拉电线，如有实验要求可与老师及时沟通。膜片钳技术用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接，被孤立的小膜片面积为微米数量级，因此封接范围内细胞膜光有少数离子通道。膜片钳技术的应用范围：在心血管药理方面的研究。

膜片钳技术发展至今，已经成为现代细胞电生理的常规方法，它不只可以作为基础生物医学研究的工具，而且直接或间接为临床医学研究服务，目前膜片钳技术普遍应用于神经（脑）科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。随着全自动膜片钳技术（Automaticpatchclamptechnology）的出现，膜片钳技术因其具有的自动化、高通量特性，在药物研发、药物筛选中显示了强劲的生命力。膜片钳和电压钳的区别：电压钳技术只能用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道活动。东莞医学膜片钳技术服务

膜片钳技术的应用范围：对药物作用机制的研究。东莞医学膜片钳技术服务

膜片钳技术：膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来，由于电极与细胞膜的高阻封接，在电极笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离，因此，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一个极为敏感的电流监视器（膜片钳放大器）测量此电流强度，就替代单一离子通道电流。膜片钳技术的建立，对生物学科学特别是神经科学是一资有重大意义的变革。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的（或多个的离子通道分子活动的技术。些技术的出现自然将细胞水平和分子水平的生理学研究联系在一起，同时又将神经科学的不同分野必然地融汇在一起，改变了既往各个分野互不联系、互不渗透，阻碍人们很全认识能力的弊端。东莞医学膜片钳技术服务

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