在生物指示剂验证试验中，需要确定孢子在实际灭菌条件下的D值，并测定孢子的纯度和数量。D值是灭菌验证的基石，需通过标准方法来精确测定，同时，实际应用中也需要结合Z值、F值等参数，优化灭菌工艺。通过科学测定D值，可确保生物指示剂真实反映灭菌效力，为医疗、制药等行业提供无菌保障。D值测定一般采用存活曲线法（FractionalNegativeMethod），该方法适用于实验室标准测定（如ISO11138、USP要求）。具体测定步骤：（1）制备生物指示剂（2）使用标准菌株（如嗜热脂肪地芽孢杆菌），确保初始芽孢量已知（3）设定灭菌条件（4）固定温度/压力（如121℃蒸汽灭菌），分多组不同时间处理（如2、4、6、8分钟）（5）回收与培养，灭菌后立即用中和剂终止反应，洗脱芽孢并接种培养（6）计数存活菌落，统计每组存活菌落数（CFU），绘制存活曲线（对数存活量vs时间）。 泰林生物指示剂（BI）的载体材质坚固耐用，适用于各种灭菌环境。云南气体用生物指示剂
压力蒸汽灭菌生物指示剂如何进行芽孢计数。（1）实验组的生物指示剂首先需要放置于95℃～100℃恒温水浴锅中进行热激活，过程约15分钟，热激活结束后，需要立即放入0℃～4℃冰水混合浴中冷却至室温。（2）其次，需要对生物指示剂芽孢进行梯度稀释，可以根据生物指示剂总芽孢数适当调整稀释级，但建议最终稀释芽孢数在30~300cfu/mL。（3）在进行计数时，取最终稀释的试管，用移液枪吸取1mL菌悬液，加入90mm的一次性无菌平皿中，并注入15mL~20mL温度不超过45℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA），混匀，每稀释级至少制备2个平板。（4）等待平板凝固后，请倒置于恒温培养箱中55℃~60℃培养24h~48h，记录各平板的菌落数，并计算每片（支）生物指示剂的总芽孢数。咨询我们，获得生物指示剂操作详细视频。 空间灭菌生物指示剂泰林干热灭菌生物指示剂适用于医疗器械、玻璃器皿、粉末及油类物质等耐高温但不耐湿热物品的灭菌验证。
过氧化氢灭菌生物指示剂的芽孢计数方法。过氧化氢灭菌生物指示剂芽孢计数—操作方法：（1）随机抽取需检验批次生物指示剂4片（支）与相关物品一并放入安全柜中，用酒精棉擦拭外表面，通风15min以上（特别提醒：不可将指示剂进行紫外照射，否则会造成计数结果偏低！！！）；（2）芽孢洗脱。在生物安全柜中，取出生物指示剂载体，分别放置于无菌试管中，向试管中加入10mL无菌纯化水，于涡旋混匀仪上震荡2min，转移至超声波清洗机中，设置频率为40KHz，处理15min，将该试管记为10-1（特别提醒：不要将多片载体放置到一个容器中进行洗脱，载体相互堆叠可能影响洗脱效果，造成计数结果偏低）。
生物指示剂作为灭菌效果验证的“金标准”，在灭菌效果验证中起到关键作用。（1）泰林精选高抗力菌株（如嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC7953），耐受性接近甚至高于一些致病菌，通过监测其存活状态，可以推断灭菌过程对其他微生物也具有足够的杀灭能力，避免因微生物差异导致的灭菌失效风险。（2）提供标准化微生物样本。在实际灭菌过程中，待灭菌物品可能携带各种微生物，而泰林生物指示剂可以提供一种标准化的微生物样本，模拟实际灭菌过程中可能存在的微生物情况，从而更准确地评估灭菌效果。（3）突破物理参数局限。物理监测（温度、压力等）只反映设备状态，无法验证微生物是否彻底杀灭。泰林生物指示剂通过模拟实际灭菌对象的微生物负载，提供“微生物水平”的直观证据，有效减少监测盲区，验证实际灭菌效果。 泰林萎缩芽孢杆菌生物指示剂，适用于过氧化氢灭菌，环氧乙烷灭菌，湿热灭菌干热灭菌，合规、准确、稳定。
汽化过氧化氢灭菌生物指示剂（BiologicalIndicator,BI）是对特定灭菌程序具有确定耐受性的活微生物制成品，通过微生物杀灭率判断灭菌工艺有效性，适用于监测汽化/雾化过氧化氢灭菌效果，常用于制药、医院、疾控等需要严格消杀的场景。泰林选用嗜热脂肪地芽孢杆菌作为生物指示剂载体，产品符合ISO11138、GB18281、PDATR51及药典（USP，EP，Chp）的质量要求，使用的芽孢可以追溯至菌种保藏中心检验报告包含芽孢浓度，D值等相关数据，有品质保障。同时，我们提供纸片式与自含式两种不同型号的生物指示剂，以自研的防蒸发结构，有效降低假阳性率，提高灭菌验证的可靠性。 5大灭菌方式全覆盖！真正的一站式灭菌验证解决方案尽在泰林生物。实验室生物指示剂应用技巧
生物指示剂对灭菌条件的敏感性强，能及时反映出灭菌过程中温度、时间等参数的变化。云南气体用生物指示剂
自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂的关键指标：抗性（D值）和培养耐受性。在应对灭菌过程中的挑战时，生物指示剂必须具备超出物品微生物负荷量以及耐受性的性能，以保证灭菌程序具备更大的安全性。一般来说，生物指示剂的抗性用D值来表示。D值是指将试验微生物杀灭90%所需的灭菌时间或灭菌剂量。自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂需使用抗力仪进行D值测定：通过阴性分数法或残存概率法计算其D值，灭菌温度一般为121℃，D值应处于1.5min~3min的范围内。同时，自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂需在55℃~60℃下培养，在必需的培养周期内，培养基的挥发难以避免。市场上不少自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂培养前需使用封口膜或其他封口材料对透气孔进行封堵，否则培养周期内培养基迅速蒸发，培养结果难以观察。故培养耐受性也是自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂不可忽视的关键性能。泰林生物的自含式压力蒸汽灭菌指示剂采用自研防蒸发结构，能够有效提升耐受性，提高灭菌验证的可靠性，欢迎咨询。云南气体用生物指示剂
浙江泰林生物技术股份有限公司（泰林生物SZ：300813）是一家有着先进的发展理念，先进的管理经验，在发展过程中不断完善自己，要求自己，不断创新，时刻准备着迎接更多挑战的活力公司。泰林不仅深受客户信赖，也在业界也收获了很多良好的评价。三十年来，泰林始终坚持在发展自身经济效益的同时，秉持公益奉献、利国利民之心，服务社会、回馈社会，关注社会公益，践行社会责任。例如在2014年杭州公交车爆燃事件中，有15人90%面积烧伤。泰林生物提供过氧化氢灭菌消毒器（环境消杀仪器）对普通病房进行消毒，以达到ICU病房级别，为病人创造了高概率无菌生存环境。
