无信号 在检测之前,转印膜在贮藏过程中发 生蛋白降解 二抗选择错误 曝光时间太短 抗原上样量不足 抗原可能被破坏 检测系统 一抗的亲和力较低 化学发光底物已丧失活性。 已从膜上剥离抗体并再次杂交。 处理方法 使用新转的膜进行实验。 检查是否使用适当的二抗。 增加曝光时间。 在凝胶上载入更多的抗原,或在载入之前使用超滤管浓缩样品, 或使用免疫沉淀,以增加凝胶中的目标蛋白量。 检查确保电泳处理未破坏抗原性。 增加(和优化)一抗的浓度和培养时间、温度。益启生物是Sigma抗体的代理商。青浦区Sigma抗体抗体代理商
在保存抗体时请注意以下几点: 为保持比较大反应性,应按照厂家说明书保存试剂(如,当指定保存温度为2-8℃时,应避免将抗体置于室温下)。保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器中,远离组织固定剂和交联试剂。除非加入稳定蛋白,如BSA(1% w/v),否则抗体不得 在工作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。保存时遇到的主要问题是细菌或***污染。 如果抗体保存在2-8℃超过2-3天,建议进行过滤除菌和/或加入抑菌剂/防腐剂,如0.05%叠氮化钠或0.1%硫柳汞。松江区CST抗体抗体商家上海标签抗体哪家靠谱?
对您的特定应用,增加(和优化)试剂浓度和培养时间。 检查确保检测试剂按建议的方法正确贮藏和使用。 从抗体缓冲液中除去吐温。 配制少量工作液(1mL),在暗室中加入HRP偶联二抗1mL。 应观察到可见的蓝光。 在再杂交过程中可能有抗原损失。 信号较弱 在凝胶上的蛋白不足 在凝胶上载入更多的蛋白,或在载入之前浓缩样品,或使用免疫沉淀以增加在凝胶运行的中靶蛋白量。 使膜曝光时间延长(1-2小时)。 转移到膜上的蛋白过少--优化转膜条件,如转膜缓冲液pH、膜类型和电压等。
用途极为***的液相悬浮芯片法,是基于Luminex公司开发的xMAP®技术。 多因子检测技术是三种**技术的结合:xMAP®微球、 Luminex液相悬浮芯片仪和分析软件。 Luminex xMAP*微珠免疫检测法的原理微球用不同浓度的红色和红外两种受光染料染色,可产生100种不同的颇色。因此,在一次分析中,每个微球具有一个基于染料浓度的光谱地址",可在Luminex液相悬浮芯片只中读取和鉴别。这些微球用搓获抗体覆盖,以便特异性结合样品中的靶标分析物"。加入报告荧光标记的检测抗体,以完或夹心ELISA,获得读数。益启生物的抗体怎么样?
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有价值的研究工具,目的是研究某一特定蛋白的关键信息,包括:小规模蛋白纯化用于功能研究,N-端序列分析,蛋白-蛋白相互作用的研究,细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素:原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前,确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。WB抗体的报价具体是多少呢?虹口区WB抗体抗体订购
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问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度,载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当,或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时, 转膜无效 转膜时,小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时, 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备(转膜盒、盒盖、电源)。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确青浦区Sigma抗体抗体代理商