疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5％脱脂奶粉（NFDM）的Tris缓冲盐水含0.1％Tweeno 20表面活性剂（TBST），并用一级抗B-Tubulin进行探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道，抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注：请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架，并用中性清洁剂洗涤，然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架，请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方上海益启生物超滤杯订购方便。杨浦区Merck电阻仪Merck仪器
有关详细信息，请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离（例如，如果使用其他二抗进行检测），则可以重新检测印迹快速清洗后，立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南，以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体，但与标准品相比，体积更小，浓度更高免疫检测。但是，当使用扩展抗体方案（第12页）时，可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度，体积和时间，其次是较高浓度的二抗，持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9虹口区MerckWB实验加速器Merck仪器哪家好益启生物公司带您了解Merck仪器。
膜Immobilon-EPVDF，0.45μm，7cmx8.4cm薄片IEVH0785050Imobilong-EPVDF，0.45μm，8.5cmx10m卷IEVHB5R1个Immbilon@-EPVDF，0.45μm，26.5cmx1.875m卷IEVH000051个Imobllon-EPVDF，0.45um，印迹三明治，7cmx8.4cmIESN0785220Imbilon9-EPVDf，0.45um，BottingSandwich，8.5厘米x13.5厘米IESN081321个Immoblon-PPVDF，0.45μm，7厘米x8.4毫米片材IPVH0785050Immobilon0-pPVDF，0.45μm，8.5厘米x13.5厘米片材IPVH0813010Imobln-pPVDF
2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1：30,0001：10,0001：10,0001：10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的，并且检测试剂的灵敏度各不相同，因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度，使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意，本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭，抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA哪家WB实验加速器是有正规授权的？
中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温，建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥，印迹不会变干，因为溶液包含在框架中。注意：如果长时间处理多个印迹，则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选：如果要回收一抗，请先将抗体回收盘放入底座，然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后，将框架放回底座上，卸下盖子，然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意：SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗，持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5，但将真空时间增加到2分钟，以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座，确保抗体上的定上海关于细胞计数器的哪家靠谱？嘉定区MerckWB实验加速器Merck仪器商家
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盘，请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息，请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量（对于MultiBlot为2.5毫升，对于迷你吸墨纸为5毫升，或10 mL用于Midi印迹）。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中，表面可能会变干。重要提示：请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下，添加30 mL洗涤缓冲液（MultiBlot为15毫升）。重复洗涤步骤3次以上（总共4次洗涤）。当框架完全为空时，将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗（对于多印迹，为2.5 mL，5毫升用于迷你印迹，或10毫升用于Midi印迹）。在室温下孵育10分钟，然后杨浦区Merck电阻仪Merck仪器
