铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。不同的大肠杆菌有不同的培养原理。小孢根霉须状变种菌种
大肠杆菌的耐药机制:根据细菌耐药性的起源,可将其分为两类:一类为固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性是细菌稳定的遗传特性,它受细菌染色体DNA控制并且是同属细菌的共同特征,固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。另一类为获得性耐药性(acquiredresistance),是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变。或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。其中,移动因子包括质粒、转座子、整合子和噬菌体。获得性耐药性主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。囊孢壳属菌种枯草芽孢杆菌能够很好的分解池中残饵、粪便、有机物等,具有很强的清理水中垃圾小颗粒的作用。
大肠埃希氏菌(Escherichiacoli,E、coli),又称大肠杆菌,是肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、埃希氏菌属(Escherichia)的表示菌。因Escherich在1885年发现而得名,因其具有结构简单、需要的营养物质简单、易于培养、繁殖速度快、分布广等特点,无论在科学试验研究中,还是在食品安全和相关疾病研究中,常作为载体菌、指示菌、病原菌备受广大科研工作者的关注。如何快速检测样品中的大肠杆菌是研究者几十年来一直亟待解决的问题,特别是大肠杆菌生长过程中的形态、染色特性等基本内容。试验通过革兰氏染色的方法,对培养8~24h大肠杆菌的形态特征进行研究,对今后更好地控制和利用大肠杆菌,具有指导意义和参考价值。
近年来,由多重耐药性金黄色葡萄球菌引起的院内传染不只是临床医师必须经常面临的棘手问题,而且已对全人类的健康构成极大威胁·一直以来,万古霉素都是临床救治革兰阳性菌传染的选择药物,曾被称为临床抗传染的”之后底线”.但万古霉素耐药性金黄色葡萄球菌已经在许多国家分离出来,这就对开发新型抗传染救治药物提出了迫切要求。金黄色葡萄球菌(Staphalococcusaureus)属革兰阳性球菌,微球菌科,葡萄球菌属。它能引起化脓性炎症,如疖、痈等。当细菌侵入血液时,可引起致病性败血症。某些葡萄球菌产生耐热的肠有害元素,从而引起食物中毒。德氏保加利亚乳杆菌LBY-27 嗜热链球菌 STY-31 婴儿双歧杆菌35624嗜酸乳杆菌 SDC2012,2013 鼠李糖乳杆菌 LC705.
对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水。从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。金黄色葡萄球利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。嗜酸热双歧杆菌嗜酸热亚种菌种
金黄色葡萄球抗原构造复杂,已发现的在30种以上,其化学组成及生物学活性了解的只少数几种。小孢根霉须状变种菌种
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:增菌培养法:(1)检样处理:按无菌操作取检样25g(ml),加入225mL灭菌生理盐水,固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。(2)增菌及分离培养:吸取5ml上述混悬液,接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内,36℃士1℃培养24h,转种血平板和Baird一Parker平板,36℃士1℃培养24h,挑取血平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。(3)形态:本菌为革兰氏阳性球菌,排列呈葡萄球状,无芽胞,无荚膜,致病性葡萄球菌菌体较小,直径约为0.5um~1um。小孢根霉须状变种菌种
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