在用酶联免疫法测定抗原或抗体时，不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式，并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择，对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解，***咱们就来了解一下这两个测量方法。酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同，一般分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路，但测定原理相同，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单。广东全自动酶标仪试用
一般酶标仪的测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有比较大吸收，当pH值降为L 0时，比较大吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。江西双检测模式酶标仪检验酶标仪比较广用于医院、血站、防疫站、生物制品等部门。
TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有比较大消光系数，如果HRP量少，H：O：和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。
多功能酶标仪又称为多功能微孔板检测仪（机）或多功能微孔板检测平台，可一对以微孔板为体系的实验提供多种不同模式的检测。通常，多功能酶标仪是指具有两种及以更多检测功能的仪器，通常的情况下至少可提供“吸收光”、“荧光”这两种常见的检测功能。而一些中端至多功能酶标仪还可支持“化学发光” 、“生物发光共振能量转移” 、“时间分辨荧光”、“荧光偏振” 、甚至还可以支持“Western Blot”和“上转换发光”等的高级检测实验。酶标仪基于滤光方式的不同可分为滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪。山西酶标仪检验
光栅式酶标仪使用方便灵活，可以通过软件选择任意波长的光。广东全自动酶标仪试用
国内多家机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的和病变（如：肝炎、、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。广东全自动酶标仪试用
