超微量分光光度计基本参数
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超微量分光光度计企业商机

朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。
朗伯比尔定律:A = abc
其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
A =abc 中,吸光系数a,表征吸光物质的 灵敏度。a值越大,灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度(单位为:mol/L),则吸光系数a可以写成ε ,ε称为摩尔吸光系数。
由上式可知,当溶液层厚度b和吸光系数a固定时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定比较大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源(单色光),进行吸光度A的测定,这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率较高的功能。四川操作简便超微量分光光度计

Micro Drop比色皿检测基本操作:
1. 准备好两个比色皿,一个加入空白检测液,一个加入样品,保证加入的液体量足够,能盖过光束,光束(2mm宽)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,请按照比色皿生产厂家的建议加入液体。
2. 抬起样品臂,把比色皿插入到仪器中,插入比色皿时要注意透光面,与仪器上面的光路指向的方向相对应。
3. 在做比色皿检测时样品臂必须放下来。
4. 在Micro Drop软件上的“选项”框中选择“使用比色皿”, 插入比色皿,勾选基线校正,设置相应参数进行空白检测及检测。
5. 当检测完成后,移出比色皿,倒出样品,清洗干净比色皿。
青海高重复性超微量分光光度计蛋白检测当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。

Micro Drop紫外可见检测功能:
1. 在功能键中选择紫外-可见。
2. 输入样品编号。
3. 增加需要检测的波长值。
4. 可以选择基线校正,默认的校准波长为750nm,也可以重新输入一个校准波长。
5. 选择叠加显示可以在采样曲线框中显示多个检测样品的实验结果。
6. 用干净的无尘纸擦干净上下基座,使用合适的液体建立空白对照,空白对照液体能够溶解目标溶液。空
白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。
基座模式:取1-2μl空白溶液加到基座上,放下检测臂并点击空白检测。
比色皿模式:插入比色皿时注意仪器上箭头指示方向。光束(2mm宽)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,请按照比色皿生产厂家的建议加入液体。
7. 按做空白检测一样加入样品,点击检测按钮开始检测。

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
分光光度计的结构:
各种型号的分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:
1)光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);
2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);
3)样品吸收池;
4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管);
5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。

光源-单色器-样品吸收池-检测系统-信号指示系统。

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每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。

超微量分光光度计比色法测定蛋白质浓度:
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等几种方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2+反应,产生蓝色的反应物。但是与Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含EDTA,Tritonx-100等物质的蛋白不适合此种方法。
Micro Drop超微量采用新一代的2048线性CCD检测单元,拥有更高的灵敏度和精确度。河南高灵敏度超微量分光光度计试用

荧光分光光度计和紫外可见分光光度计是实验室常用的光学仪器。四川操作简便超微量分光光度计

超微量分光光度计的应用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链DNA、双链DNA,以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度,分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
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