超微量分光光度计基本参数
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  • 宝予德
  • 型号
  • 齐全
超微量分光光度计企业商机

传统分光光度计:
样品体积要求大,绝大部分要50μL以上;
需使用比色皿,每次换样品时,比色杯需要清洗,工作繁重;
光程一般为10mm,样品需要稀释,测量浓度范围小;
灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成,寿命短;
需要预热半个小时以上;
显示吸光度值,不显示浓度值;
仪器体积大,质量重;
超微量分光光度计;
所需样品体积小,*需1~2μL;
不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上;
具有多个光程(电机控制自动选择光程),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍;
氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定;
不需要预热,可随时检测;
显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料)。
Micro Drop为一款全波长(185~910nm)超微量紫外可见分光光度计。浙江性能稳定超微量分光光度计厂家直销

超微量分光光度计比色法测定蛋白质浓度:
BCA法:这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2+反应产生Cu+,后者与BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强,反应后形成的化合物非常稳定。相对于Lowry法,操作简单,敏感度高。但是与Lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。
Bradford法:这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应,产生的有色化合物吸收峰595nm。其比较大的特点是,敏感度好,是Lowry和BCA两种测试方法的2倍;操作更简单,速度更快;只需要一种反应试剂;化合物可以稳定1小时,方便结果;而且与一系列干扰Lowry,BCA反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。但是对于去污剂依然是敏感的。**主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性。
浙江高灵敏度超微量分光光度计价格优惠BCA法的原理是蛋白在碱性溶液里与Cu2+形成紫色化合物,吸收峰在562nm波长。

超微量分光光度计比色法测定蛋白质浓度:
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等几种方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2+反应,产生蓝色的反应物。但是与Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含EDTA,Tritonx-100等物质的蛋白不适合此种方法。

荧光分光光度计和紫外可见分光光度计是实验室常用的光学仪器。
主要区别如下:
1、荧光分光光度计有两个单色器,而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。
2、荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外可见分光光度计是成一条直线的。
3、荧光分光光度计是以氙灯做为光源,而紫外可见分光光度计是以氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源。
4、荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面,而紫外可见分光光度计*为两面为光学面。
单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量。

分光光度计是一种分析测量光谱的仪器,因为应用需求的不同,分光光度计有着不同的种类。分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:
(1)可见光分光光度计:用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。
(2)紫外分光光度计:紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。
(3)红外分光光度计:一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物**常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。
(4)荧光分光光度计:荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。应用于科研、化工、医药、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域。
(5)原子吸收分光光度计:该法主要适用样品中微量及痕量组分分析常规仪器之一。是材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属(半金属)元素分析的有力工具。
现今生命科学领域比较流行的超微量分光光度计是属于紫外分光光度计的一种。
朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。山西性能稳定超微量分光光度计紫外检测

Micro Drop可以检测45-48mm的10mm光程的比色皿。浙江性能稳定超微量分光光度计厂家直销

超微量分光光度计的应用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链DNA、双链DNA,以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度,分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
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