外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。二是PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法较新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。外泌体分离是外泌体研究中的重要步骤。宁波血浆外泌体供货商
分离外泌体的方法之超滤：样品通过0.2μm聚醚砜（PES）膜过滤，较大的颗粒物质（如细胞碎片和凋亡体）被滞留出来。然后，包括外泌体在内的半处理滤液样品通过TFF系统通过500kDa截止滤芯进行超滤过程，进料流速为120mL/min，跨膜压力<3.5psi跨膜压力>10:1，外泌体太大而无法通过毛孔并保持保留。相反，包括游离蛋白在内的小分子通过中空纤维孔并作为渗透物洗脱并较终从过程中丢弃。为了获得高质量的外泌体分离和纯化，通过TFF连续重新浓缩截留物样品，并去除小于500kDa的污染物。较后，将纯化的外泌体重悬并储存在-80°C的聚对苯二甲酸乙二醇（PETG）瓶中的0.1M蔗糖中，并用于所需的分析。通常，通过结合超滤加超速离心或离心加超滤等不同分离方法可以成功分离外泌体，使用较低孔径的膜过滤和超速离心可提供纯外泌体。宁波血浆外泌体供货商外泌体分离的方法会影响外泌体样品的质量和数量。
外泌体分离方法之亲和层析分离法：在亲和层析分离法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素将结合存在于外泌体表面的糖基化蛋白质，从而使外泌体沉淀。Vn肽分离技术基于其对含有HSP的细胞外颗粒的高亲和力。然而，这种方法比较容易使提取物被膜表面上含有上述标记物的细胞和其他颗粒污染。外泌体分离方法之介电泳分离法：介电泳分离法主要利用不同大小的粒子在不均匀电场中的位置差异。外泌体被吸引到高电区域，而较大的颗粒将位于低电区域。该方法速度快，适合用于高通量筛选，但缺点是需要加热。
外泌体衍生物miRNA的重要应用：miRNA是一类主要的小分子、单链、非编码RNA分子，其成熟形式的长度在20到22个核苷酸(NT)之间，在几乎所有生物途径中发挥重要作用，包括细胞生长、增殖、分化、免疫反应，细胞凋亡，代谢和疙瘩发生。外泌体在体液中的主要作用是可以保护miRNA，防止其生物分子在非生理条件下（多次冻融循环、长期储存和极端pH）降解。据报道，外泌体来源的miRNA在-20°C下可保持稳定长达5年，并且对冻融循环具有抵抗力.这也使外泌体成为病症和其他疾病的潜在生物标志物。miRNA与包括病症在内的许多疾病的发病机制有关，并且还被证明被远端或附近的受体细胞吸收作为外泌体中的货物，作为细胞间通讯的一种方法，可能会影响发病机制。所以，外泌体可以被看作是miRNA转移至目标受体细胞的载体。外泌体的分离方法可能还存在一定的局限性和偏差。
通过对外泌体以及外泌体提取相关生物试剂的研究发现：外泌体除了蛋白质，外泌体还含有RNA。外泌体miRNA可用于各种疙瘩的判断。目前有八种miRNA被确定为卵巢病的标志物。此外，据报道，肺腺病者的血清和疙瘩样本中的miRNA会增加。前列腺病的血清中外泌体miRNAmiR-141和miR-375水平会升高。研究表明，外泌体miRNA-21的血清水平升高和miRNA-1246在ESCC群体中凸现。有趣的是，外泌体miRNA可能是肾纤维化和心血管症的潜在判断标志物。对于进行型退行型疾病，在阿尔茨海默者的生物体液中发现了几种miRNA，如：miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134和miRNA-137miRNA124的高表达水平。外泌体的转移涉及细胞因子、基质降解酶和细胞外基质重塑等多种调节步骤。广州上清外泌体分离费用
外泌体分离器材的选择也对分离结果有一定的影响。宁波血浆外泌体供货商
外泌体衍生物miRNA的重要应用：外泌体保护miRNA免于降解，使它们比游离miRNA更稳定，并能被特定受体细胞有效整合。因此，在外泌体携带的货物中，miRNA可以提供有关它们来源的细胞类型、靶标和细胞状态的身份信息。越来越多的证据表明，疙瘩细胞来源的外泌体已成为通过传递病miRNA促进疙瘩细胞增殖、侵袭、血管生成、远处转移和疙瘩微环境重塑的主要候选者。血管生成对于恶性疙瘩的生长和转移至关重要，因为新血管可以提供额外的氧气和营养物质，还可以清理废物。比如：病细胞释放外泌体exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促进增殖、血管生成和疙瘩转移。宁波血浆外泌体供货商
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