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外泌体基本参数
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  • 苏州英泽生物医药科技有限公司
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  • 型号齐全
外泌体企业商机

外泌体衍生物miRNA的重要应用:外泌体保护miRNA免于降解,使它们比游离miRNA更稳定,并能被特定受体细胞有效整合。因此,在外泌体携带的货物中,miRNA可以提供有关它们来源的细胞类型、靶标和细胞状态的身份信息。越来越多的证据表明,疙瘩细胞来源的外泌体已成为通过传递病miRNA促进疙瘩细胞增殖、侵袭、血管生成、远处转移和疙瘩微环境重塑的主要候选者。血管生成对于恶性疙瘩的生长和转移至关重要,因为新血管可以提供额外的氧气和营养物质,还可以清理废物。比如:病细胞释放外泌体exo-miR-21、exo-miR-23;外-miR-29;exo-miR-103和exo-miR-210可以促进增殖、血管生成和疙瘩转移。外泌体与神经系统的关系复杂,通过在神经元间的转移,参与多种神经疾病的发生和病理机制的形成。广州快速提取外泌体多少钱

外泌体的表征方法:根据药物递送系统(DDS)表征外泌体结构至关重要,因为它决定了DDS的特性,例如细胞或组织亲和力、应激反应、吸收途径和药物释放。2014年和2018年国际细胞外囊泡学会(MISEV2018)提出了外泌体(包括研究和外泌体制备)应满足的基本要求指南。在开发基于外泌体的DDS时,必须考虑数量、大小、形态、膜组成和蛋白质(包括受体)等参数。这些参数表征所用的技术主要为光学、非光学和微流体技术。外泌体的表征方法之非光学方法:FTIR光谱和衰减全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌体质量量化和脂质和蛋白质含量的总体估计。使用TRPS,可以同时测量大小、浓度和zeta电位。由于扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜的成本较高,近些年来,一种新型的纳米粒度分析仪器在外泌体研究领域迅速发展,比如:粒度分析仪可以不只可以进行单颗粒检测,颗粒粒径检测还可以检测细胞外泌体的浓度、zeta电位、形态等进行多维度检测。广州快速提取外泌体多少钱优化外泌体分离方法可以用于解决外泌体复杂性掩盖的问题。

外泌体蛋白质特征是:膜结合四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81和CD82),以及常规用于分离的EpCAM和Rab5。其他公认的蛋白质是受体(CD46和CD55)、热休克蛋白(HSP;Hsc70、Hsp70和Hsp90)、参与外泌体形成的蛋白质(Alix、TSG101)和负责融合和转运的膜蛋白(GTP酶、膜联蛋白和flotillin;ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法检测这些标记蛋白可以用于确认外泌体的存在。也有相关研究称外泌体含有其他颗粒,如胆固醇(B淋巴细胞来源)、鞘脂、磷酸甘油酯和神经酰胺等。外泌体还运输形态发生素(Hedgehog、Wingless和Wingless-like),参与黑腹果蝇所描述的组织模式发育。

分离外泌体的方法之降水:它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在益处。该方法首先利用DL-二硫苏糖醇溶液还原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合网络,然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可实现外泌体的沉淀。还有利用聚合物沉淀方法并消除超速离心的商业试剂盒。ExoQuick™、Exo-spin™是来自Invitrogen™和miRCURY™的市售总外泌体分离试剂。外泌体来源于细胞内各种类型的囊泡,包括内质网、高尔基体和细胞膜等。

外泌体可以传递生物分子,例如蛋白质、DNA、mRNA等,影响接收器细胞的表现型和生理活性。外泌体可通过特定的组装和功能修饰,提高其对宿主细胞的选择性靶向性。核酸是在外泌体中发现的另一组主要颗粒,即DNA和RNA,它们可以在细胞中发挥功能作用。在源自小鼠和人类肥大细胞的外泌体中发现了约1300种mRNA、121种miRNA和>100种小RNA,但未检测到DNA和rRNA。在外泌体中发现的其他miRNA是lin-4和let-7,以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌体对人类细胞的刺激可以导致人类细胞中小鼠蛋白质的合成。此外,外泌体和受体细胞的mRNA谱不同,表明mRNA被主动分选为MVB。外泌体不是干细胞,是干细胞较精华的部分。广州快速提取外泌体多少钱

外泌体通过调节免疫系统和疙瘩微环境,在疙瘩免疫治着中的作用日益受到关注。广州快速提取外泌体多少钱

外泌体还参与神经退行型症。在神经退行型症个体的脑脊液和外周血中已检测到几种特定于阿尔茨海默氏症、帕金森氏症和Creutzfeldt-Jakob的聚集蛋白。特别是,在从阿尔茨海默者的脑脊液样本中获得的外泌体中检测到Thr-181磷酸化的tau。在Thr-181磷酸化的Tau是阿尔茨海默的既定生物标志物。此外,α-突触核的蛋白也常在阿尔茨海默者的群体中检出。此外,在尿液中发现的外泌体标志物也可以是膀胱和前列腺疙瘩的标志物。比如:视黄酸诱导蛋白3(GPRC5A)、抵抗素、外泌体蛋白PCA-3、TMPRSS2:ERG、α1-抗胰蛋白酶、组蛋白H2B1等。除了脑和泌尿道疙瘩外,外泌体蛋白也可以是胰腺病的标志物。比如:结直肠病的外泌体蛋白标志物包括EpCAM、cadherin-17、粘蛋白13(MUC-13)、角蛋白18、claudins和ephrinB1。广州快速提取外泌体多少钱

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