CHO细胞外泌体的分离和表征：CHO细胞是一种普遍用于生物制药蛋白质生产的宿主。CHO细胞中分离外泌体主要采用聚合物的沉淀(PBP)技术从分批培养中分离和富集细胞外泌体囊泡。分离后的外泌体可以通过多种方法来检测和表征分离的囊泡，这些分析包括动态光散射(DLS)和Zeta电位测量、电子显微镜(EM)和外泌体标记物分析、RNA和脂质分析等。根据制造商的指南，使用TEI总外泌体分离试剂盒（Invitrogen）从培养基中分离外泌体。将细胞培养基以2000×g离心30分钟以去除细胞和任何碎片；随后将上清液小心移至离心管管中，加入0.5倍体积的TEI试剂，充分混合并在4°C下孵育过夜。然后将样品在4°C下以10,000×g离心1小时，然后在弃去上清液后，将富含外泌体的颗粒重新悬浮在75μlPBS缓冲液中。然后将样品储存在-20°C下，直到需要进行后续分析。外泌体富集、分离和检测是当前外泌体研究的热点之一。烟台血液DNA外泌体分离
分离外泌体的方法之免疫亲和相互作用：免疫亲和法是利用外泌体表面蛋白（抗原）与其靶抗体或分离配体分子之间的免疫亲和相互作用原理分离纯外泌体的理想方法。它有助于根据其表面标志物分离特定类型的外泌体。基于微孔板的酶联免疫吸附测定（ELISA）是免疫亲和分离试剂盒的一个例子，用于根据外泌体表面标志物分离外泌体。Tetraspanin蛋白是这种分离方法的决定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫亲和外泌体分离中使用的抗体的常见示例。免疫亲和法可用于从结肠病细胞中分离外泌体，其效率高于超速离心和密度梯度分离。另外还有一种外泌体分离方法，该方法采用抗体包被的基于磁性颗粒的技术来分离外泌体。烟台血液DNA外泌体分离外泌体膜表面富含糖基化蛋白和糖基化脂质，这种糖基化在外泌体相互作用和定位中具有重要作用。
外泌体分离方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技术通常包括将生物流体与含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速离心。用于基于聚合物的沉淀的较常见聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。这种聚合物的沉淀可以对分离的外泌体产生温和影响而且可以产生中性的pH值。由此，出现了几种常见的外泌体试剂盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速执行，无需额外设备，只需用高速离心机进行超速离心可以获得高产量的外泌体。但是此方法的缺点是：非外泌体材料对外泌体分离物的污染仍然是基于聚合物的分离方法的一个问题。此外，分离物中的聚合物可能会干扰下游分析。
分离外泌体的方法之密度梯度超速离心：有助于根据尺寸、结构和形态差异分离和分析纳米级材料。DGUC“细化”分离的囊泡，并使用密度为1.07g/mL或更低的密度梯度培养基。水中碘沙醇、冰冷的PBS和蔗糖是用于外泌体分离的常见梯度培养基。有市售的碘沙醇密度梯度分馏膜，用于将外泌体与非囊泡成分分离。将生物悬浮液添加到梯度培养基中，并以完整的梯度分层组分。DGUC有助于分离具有相同梯度的样品。凋亡小体、蛋白质聚集体和其他非外泌体微囊泡可能通过超速离心干扰较终分离的外泌体产物。DGUC有助于克服超速离心的局限性，并提供较纯净的外泌体。DGUC在精细化和高性能外泌体分离方法中的应用。简而言之，在分离细胞碎片后，应用1×105g用60%碘沙醇离心3小时，然后用1×10离心5用40%碘沙醇g18小时有助于形成多达12个碘沙醇梯度级分和两个外泌体级分。超速离心使用连续的密度梯度或逐步梯度来较小化这些颗粒材料对外泌体的干扰。外泌体的构成：外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。
外泌体分离方法之超速离心法：超速离心基于颗粒的大小（重量）及其在离心力（100,000–110,000×g）下的离心沉降。至于去除的细胞碎片和不需要的颗粒可以通过称为差速离心的几步慢速离心来获得。外泌体的纯化可以采用蔗糖梯度密度离心纯化法：即：在蔗糖梯度(1.13–1.19g/mL)或缓冲液中进行，以实现更高的富集、产量和纯度增加。外泌体分离方法之微流控分离法：微流控分离法主要是在微芯片上进行的，这里我们需要提及的是，微流控分离法法可用于外泌体分离（免疫结合和磁结合、过滤），效率相对较高（约90%）。优化外泌体分离方法可以提高分离效率和分离精度。烟台血液DNA外泌体分离
外泌体可通过细胞间物质转移影响细胞的增殖、分化和生物学行为。烟台血液DNA外泌体分离
外泌体分离方法之亲和层析分离法：在亲和层析分离法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素将结合存在于外泌体表面的糖基化蛋白质，从而使外泌体沉淀。Vn肽分离技术基于其对含有HSP的细胞外颗粒的高亲和力。然而，这种方法比较容易使提取物被膜表面上含有上述标记物的细胞和其他颗粒污染。外泌体分离方法之介电泳分离法：介电泳分离法主要利用不同大小的粒子在不均匀电场中的位置差异。外泌体被吸引到高电区域，而较大的颗粒将位于低电区域。该方法速度快，适合用于高通量筛选，但缺点是需要加热。烟台血液DNA外泌体分离
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