外泌体的表征分析：动态光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析仪测定外泌体制剂中的粒度分布。动态光散射测量由于溶液中粒子的布朗运动引起的散射光强度的动态波动，（685nm的激光，检测角度为15、90、175度）；较小的粒子比较大的粒子移动得更快。确定颗粒大小时，通常使用三种分布类型：(1)数量分布，报告不同大小“箱”中的颗粒数量；(2)体积分布报告不同尺寸类别的颗粒总体积；(3)强度分布，报告不同大小颗粒散射的光。也可以使用高分辨率纳米粒径分析仪NanocoulterⅠ来分析样品中每种大小的囊泡的实际数量、浓度及粒子动态、Zeta电位等。为了进行分析，将先前储存在-20°C的75μl等分试样的外泌体制剂用925μlPBS稀释（得到1ml）并转移到一次性比色皿中用于DLS测量。分离过程中避免对外泌体结构和功能造成影响至关重要。武汉外泌体多少钱一次
分离外泌体的方法之超滤：样品通过0.2μm聚醚砜（PES）膜过滤，较大的颗粒物质（如细胞碎片和凋亡体）被滞留出来。然后，包括外泌体在内的半处理滤液样品通过TFF系统通过500kDa截止滤芯进行超滤过程，进料流速为120mL/min，跨膜压力<3.5psi跨膜压力>10:1，外泌体太大而无法通过毛孔并保持保留。相反，包括游离蛋白在内的小分子通过中空纤维孔并作为渗透物洗脱并较终从过程中丢弃。为了获得高质量的外泌体分离和纯化，通过TFF连续重新浓缩截留物样品，并去除小于500kDa的污染物。较后，将纯化的外泌体重悬并储存在-80°C的聚对苯二甲酸乙二醇（PETG）瓶中的0.1M蔗糖中，并用于所需的分析。通常，通过结合超滤加超速离心或离心加超滤等不同分离方法可以成功分离外泌体，使用较低孔径的膜过滤和超速离心可提供纯外泌体。武汉外泌体多少钱一次外泌体分离器材的选择也对分离结果有一定的影响。
外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。二是PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法较新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。
外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。二是微流控分离法，该方法通过负压及震荡等机械原理分离外泌体，产量纯度均具有较大幅度提高，但需要特定设备配合。外泌体分离方法之纳米粒径分析法：确定性横向位移依赖于颗粒流动路径的变化，而颗粒流动路径取决于颗粒尺寸。这种方法虽然比较简单，但是需要使用扫描电镜技术、动态光散射技术、纳米粒子跟踪分析技术、单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术等。对于外泌体大小、形态、外泌体的浓度、zeta电位等分析也可以使用粒度分析仪。优化外泌体分离方法可以提高分离效率和分离精度。
差速离心法分离外泌体的实验原理：任何外泌体分离方案旨在获得产量合理且不受细胞碎片、细胞器和凋亡小体污染的外泌体群体，理想情况下，不含其他类型的细胞外囊泡、蛋白质及其聚集体。由于大小差异很大，将外泌体与细胞、细胞碎片和大囊泡分离相对容易。巨大的挑战是从小的脱落囊泡中纯化外泌体，因为它们的大小非常相似。通过差速离心分离这些细胞外囊泡既困难又低效。所以需要根据转子的特性和要分离的颗粒的特性，来对离心参数应进行调整。因为离心速度与粒子的旋转半径成正比，所以离心运动加速。粒子的径向坐标随时间t呈指数增长。外泌体在很多生理和病理情况下都发挥着不可或缺的作用。武汉外泌体多少钱一次
分离样品前的处理对较终外泌体分离的效果有较大影响。武汉外泌体多少钱一次
外泌体分离方法之密度梯度离心法：这种方法将超速离心机的超速离心与蔗糖密度梯度相结合。具体地说，密度梯度离心用于将外泌体与非囊泡颗粒（例如蛋白质和蛋白质/RNA聚集体）分离。因此，该方法将囊泡与不同密度的颗粒分离。足够的离心时间比较重要，否则如果外泌体部分具有相似的密度，则仍可能在外泌体部分中发现污染颗粒。该结构不会让大于1μm的细胞和其他颗粒进入布线区域。一些较小的颗粒和细胞碎片可以进入微柱区域，但被纳米纤毛排除，形成直径为30-200nm的孔。纤毛结构选择性地捕获外泌体和小细胞外囊泡。武汉外泌体多少钱一次
