在生物流体中发现的细胞外囊泡包括来自内体，多泡体的细胞外泌体（30nm至150nm）和来自质膜的微泡（150nm至1000nm）。目前已知有多种从生物体液中分离外泌体的方法除了使用高速离心机的离心分离法以外，还有色谱法、超滤过滤法、基于聚合物的沉淀和免疫分离法等。#外泌体干细胞#这些细胞外泌体分离方法提取的外泌体要警惕非外泌体颗粒污染，如凋亡小体、凋亡小囊泡、外泌体和脂蛋白，均会对获得的外泌体生物活性产生影响。另外，分离方法也会影响细胞外泌体的纯度和产量。如果要从培养基中分离外泌体，就要使用无血清培养基或无外泌体胎牛血清。分离样品前的处理对较终外泌体分离的效果有较大影响。重庆血浆外泌体分离稳定性好
外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。二是微流控分离法，该方法通过负压及震荡等机械原理分离外泌体，产量纯度均具有较大幅度提高，但需要特定设备配合。外泌体分离方法之纳米粒径分析法：确定性横向位移依赖于颗粒流动路径的变化，而颗粒流动路径取决于颗粒尺寸。这种方法虽然比较简单，但是需要使用扫描电镜技术、动态光散射技术、纳米粒子跟踪分析技术、单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术等。对于外泌体大小、形态、外泌体的浓度、zeta电位等分析也可以使用粒度分析仪。重庆血浆外泌体分离稳定性好外泌体分离器材的选择也对分离结果有一定的影响。
外泌体（细胞外囊泡）目前被认为是通过生物活性脂质、蛋白质以及RNA来进行细胞之间的通讯，同样外泌体也是目前研究较深入的细胞外囊泡，外泌体的直径只有我们头发直径的百万分之一（30~150nm），当多泡体与细胞膜融合时释放到细胞外的时候，富含许多生物活性分子，如脂质、蛋白质、转移RNA以及微小RNA等就会被外泌体被释放到细胞外，这样一来就可以被微环境中的靶细胞吸收并且通过通过生物体液运送到远处。而外泌体与“目标”进行交流方式主要有两种途径，一是通过胞吞作用被摄入到细胞内；二是通过膜融合的方式来与靶细胞膜进行融合，接着就会直接释放其中含有的物质以及信息至靶标细胞，其实外泌体的作用形式是相互的靶细胞分泌含有细胞特异性RNA的外泌体作用于周围细胞后可诱导其表型重组而获得组织特异性的表型，而周围细胞分泌的外泌体则可以通过调控蛋白表达来调控细胞的生理过程。
差速离心法分离外泌体的实验原理：离心管内粒子的速度，由三种力（离心力、阿基米德浮力和斯托克斯粘性阻力）的平衡决定，如：其中geff为离心力（加速度），R为旋转半径，即粒子距旋转轴的距离，ω为旋转角频率，d为粒子直径，ρ为质量粒子的密度和ρsolv和η分别是介质的密度和粘度。在固定的离心条件（转速和介质成分）下，粒子速度完全由粒子的形态和密度决定。密度高于介质密度的粒子沿离心力“向下”运动，而比介质轻的粒子沿与离心力相反的方向“上浮”。对于相似的密度，较大的粒子迁移得更快。因此，在生物学中，离心主要用于按大小（差速和速率区带离心）或按密度（等密度离心）分离不同的物体。在这项研究中，我们专注于使用差速离心按大小进行颗粒分级。外泌体可通过细胞间物质转移影响细胞的增殖、分化和生物学行为。
外泌体分离方法之过滤法：超滤膜也可用于外泌体的分离。根据微泡的大小，使用超滤膜过滤的方法可以将外泌体与蛋白质和其他大分子分离。外泌体也可以通过多孔结构捕获它们来分离。常见的过滤膜孔径为0.8m、0.45m或0.22m，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌体。比如微柱多孔硅纤毛结构一般用于分离40-100nm外泌体。在初始步骤中，去除较大的囊泡。在接下来的步骤中，外泌体会群集中在过滤膜上。隔离步骤相对较短，但该方法需要用PBS缓冲液对硅结构进行预孵育。除标准过滤技术外，切向流过滤在有效分离外泌体方面也有着尝试应用，通过切向流过滤技术去除游离肽和其他小化合物从而分离具有确定大小的外泌体。此外，在体外研究和脂肪组织中，也会采用超滤与SEC的结合的方式来分离外泌体。通过(a)对片上过滤器施加压力或(b)产生电场，迫使外泌体穿过多孔膜，结合错流和电泳分选来完成筛分。外泌体与生物体的免疫应答密切相关，通过它们携带的抗原和免疫调节分子对免疫系统起到调节作用。潍坊外泌体分离企业
不同来源的外泌体可能需要采用不同的离心参数和分离方法。重庆血浆外泌体分离稳定性好
外泌体分离方法之密度梯度离心法：这种方法将超速离心机的超速离心与蔗糖密度梯度相结合。具体地说，密度梯度离心用于将外泌体与非囊泡颗粒（例如蛋白质和蛋白质/RNA聚集体）分离。因此，该方法将囊泡与不同密度的颗粒分离。足够的离心时间比较重要，否则如果外泌体部分具有相似的密度，则仍可能在外泌体部分中发现污染颗粒。该结构不会让大于1μm的细胞和其他颗粒进入布线区域。一些较小的颗粒和细胞碎片可以进入微柱区域，但被纳米纤毛排除，形成直径为30-200nm的孔。纤毛结构选择性地捕获外泌体和小细胞外囊泡。重庆血浆外泌体分离稳定性好
