TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
改良R2A琼脂(ModifiedR2Amedium)是一种应用的低营养培养基,用于微生物的分离、计数和鉴定,特别是在水质检测中用于测定细菌总数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氢二钾-无水硫酸镁-酸钠-琼脂2.**pH值**:通常调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于纯化水中菌落总数的测定。-适用于EP(欧洲药典)、USP(美国药典)、ChP(中国药典)标准。4.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至适宜范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。5.**保存条件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事项**:-在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。-使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。7.**应用**:-在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广的应用。8.**质控结果**:质控菌株接种后于30-35℃需氧培养48-120小时,用于评估培养基的性能。改良R2A琼脂因其营养丰富、操作简便和应用广,成为实验室中常用的培养基之一。缓冲MUG琼脂培养皿明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。巴氏芽孢杆菌的芽孢具有多层保护结构,包括芽孢外壳和芽孢皮层,这些结构由多种蛋白质组成。
M-远藤氏防腐培养基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一种用于微生物检测的培养基,主要用于水中大肠菌群的膜过滤法检测。以下是它的一些特点和配制方法:1.**配方**:M-远藤氏防腐培养基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸十二烷基钠、去氧胆酸钠和亚硫酸钠等成分,以及作为指示剂的碱性品红。2.**配制方法**:通常称取一定量的培养基粉末,加入指定量的无水乙醇和蒸馏水,加热至沸腾以帮助溶解。配制好的培养基通常需要在121℃下高压灭菌15分钟。3.**用途**:这种培养基专门用于检测饮用水、废水、乳制品和食品中的大肠菌群,是执行标准方法的一部分,如美国公共卫生协会(APHA)所推荐的方法。4.**贮藏条件**:配制好的培养基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**结果观察**:在M-远藤氏防腐培养基上,乳糖发酵型的大肠杆菌和大肠菌群会产生红色至深红色的菌落,带有金色金属光泽,而非乳糖发酵型微生物则产生无色透明菌落。6.**产品规格**:M-远藤氏防腐培养基通常以250g/瓶的规格出售,并且有较长的保存期限,一般为3年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应避免摄入、吸入和皮肤接触,以确保操作安全。BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离,也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等。药敏试验琼脂预装培养皿
尽管哥伦比亚血琼脂基础有许多优点,但也存在一定的局限性,如对嗜血杆菌生长的抑制以及受血液类型的影响。缓冲MUG琼脂培养皿
弯曲杆菌琼脂基础是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特点:1.**选择性培养**:弯曲杆菌琼脂基础通常与特定的选择性添加剂一起使用,如改良Karmali选择性添加剂或弯曲杆菌选择性添加剂,这些添加剂含有抗生物质,如万古霉素和两性霉素B,以抑制其他非目标微生物的生长,提高目标弯曲杆菌的分离率。2.**无血培养基**:某些类型的弯曲杆菌琼脂基础是无血的,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。无血培养基通常使用活性炭、硫酸亚铁和酸钠替代血液。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%。因此,弯曲杆菌琼脂基础通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在适宜的条件下,空肠弯曲杆菌在弯曲杆菌琼脂基础中生长,形成灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.配方:弯曲杆菌琼脂基础的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化钠、琼脂等,提供碳、氮源、维生素和生长因子。