dna 羟甲基化检测方法

案例1：人类mRNA上2’-O-RNA甲基化转录组图谱 原文：Nm-seq maps 2’-O-methylation sites in human mrna with base precision 期刊：Nature Methods 影响因子：26.9 美国芝加哥大学研究团队利用2’-O-RNA甲基化测序手段，检测mRNA分子上的甲基化位点。与m6A RNA甲基化测序数据相比，2’-O-RNA甲基化位点主要分布在转录组CDS区，其中近一半在剪接位点附近，相当一部分在内含子中发现Nm位点。三分之一的2’-O-RNA甲基化位点在AGAUC处存序列偏好性，并且跟随了5个碱基的A或G碱基高分布。有趣的是，2’-O-RNA甲基化位点富含三种氨基酸的编码密码子。总的来说，该文章揭示了2’-O-RNA甲基化在人类细胞中的分布特征。ctDNA 的甲基化检测，同时结合了 ctDNA 测序于 DNA 甲基化测序的优势。dna 羟甲基化检测方法

样本要求1）样品类型：细胞、新鲜组织或RNA样品。2）样品量：细胞：2×107组织：500mg-1gRNA：30-300μg，浓度不低于100ng/μL3）RNA质量要求：OD260/280：1.8~2.1浓度≥100ng/μlRNA无明显降解（28S:18S≥1.5或者RIN≥7）4）样品保存：新鲜组织可用RNA保护剂处理或液氮冻存后，-80℃保存。细胞样品，离心收集细胞沉淀后用PBS洗2遍，直接-80℃保存；RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存。样品保存Note:样品保存期间避免反复冻融。5）样品运输：样品置于1.5mlEppendorf管或冻存管中，封口膜封好，装在塑料袋中，干冰运输。内蒙古mRNA甲基化2’-O-RNA甲基化是一种受RNA甲基化酶或纤维蛋白酶作用下。

云序优势 一站式服务： 客户只需提供细胞、组织或RNA，云序生物为您完成从MeRIP富集，文库制备，上机测序到数据分析整套服务流程。 优化的实验流程： MeRIP的富集效率是决定数据质量的关键，云序生物MeRIP实验采用预验证的商业化抗体和精心优化的实验流程，具有极高的效率和特异性。 严格的质控： 云序生物对MeRIP实验的各个关键步骤进行严格的质控，全程监控实验质量，确保客户得到优zhi的数据。 专业的生物信息学分析： 云序生物具有强大的生物信息学团队，能够满足客户的各类深入数据分析需求。 特异性高： 通过抗体特异性富集发生甲基化修饰的RNA的片段，以较低的成本实现转录组范围的RNA甲基化研究。

案例1：拟南芥花叶根组织m6ARNA甲基化谱原文：Transcriptome-widehigh-throughputdeepm6A-seqrevealsuniquedifferentialm6AmethylationpatternsbetweenthreeorgansinArabidopsisthaliana期刊：GenomeBiology影响因子：13.21西北农林科技大学联合中科院和普渡大学，借助m6ARNA甲基化测序技术，对比拟南芥花，叶，根组织中（每种组织有两个生物学重复）m6ARNA甲基化情况。结果发现检测组织中m6ARNA甲基化修饰程度比人类高10%左右，占转录组的83%。将甲基化RNA特异性抗体与被随机打断的RNA的片段进行共孵育。

案例2:m5CRNA甲基化基因组分布图谱原文：Distinct5-methylcytosineprofilesinpoly(A)RNAfrommouseembryonicstemcellsandbrain期刊：GenomeBiology影响因子：13.21近期刊登了解析RNAm5C在不同组织细胞的分布图谱相关文章。研究人员选取小鼠胚胎干细胞（ESC）和脑组织（n=3）作为实验样本，利用m5CRNA甲基化测序技术对两组样本中的总RNA和胞核RNA进行检测。结果表明，ESC中总RNA5mC的分布频率比脑组织的分布频率更高。研究人员将m5C位点和不同的基因组区域（CDS,5’-UTR,3’-UTR等）进行了关联分析。结果表明，总RNA中m5C位点更倾向于分布在转录起始位点。脑组织和ESC中，3’-UTR区m5C的分布区别很大，这暗示着3’-UTR区的RNAm5C修饰可能与细胞功能和细胞类型密切相关。云序生物率先开展m5C RNA甲基化测序服务，采用经典重亚硫 酸盐处理的方式进行测序。外泌体甲基化测试

RNA m6A甲基化是RNA较关键的内部修饰之一。dna 羟甲基化检测方法

研究表明，RNAm6A修饰影响mRNA的转录、定位、翻译、稳定性、剪接和核输出。然而，转录组m6A谱及其在白菜热胁迫中的潜在生物学作用尚缺乏足够的资料。通过MeRIP-seq获得白菜中RNAm6A修饰的first转录组全谱。同时，通过分析Input测序数据获得转录组数据。发现在正常组(CK)和热应激组(T43)中鉴定出11252个m6A共有峰和9729个含有m6A的共有基因。且CK组和T43组中，m6A峰均在3’UTR区高度富集。大约80%的基因有一个m6A位点。m6A峰的共识基序为AAACCV(V:U/A/G)。此外，关联分析发现m6A的甲基化程度与转录水平存在一定的相关性，说明m6A在基因表达中起一定的调控作用。dna 羟甲基化检测方法

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