仪器预热与校准开机预热(通常 10-15 分钟),确保光源稳定。用相应的缓冲液(如 TE 缓冲液、RNase-free 水)进行 “空白校准”:取 1-2μL 缓冲液滴在检测探头上,闭合探头,执行校准程序(消除背景干扰)。样品准备确保样品充分混匀(避免沉淀或浓度不均),若浓度过高需稀释(如 DNA 浓度 > 1000ng/μL 可能超出线性范围)。避免样品中含气泡、纤维或大量颗粒(会导致吸光度异常)。上样与检测取 1-2μL 样品,滴在仪器的检测探头上(注意不要触碰探头表面,避免污染)。轻轻闭合探头(防止样品溢出),选择检测模式(如 “dsDNA”“RNA”),启动检测(1-2 秒内完成)。记录结果:浓度(ng/μL)、A260/A280、A260/A230 比值等。清洁与关机检测完成后,用无绒纸巾轻轻擦拭探头表面(去除残留样品),若样品含盐分或蛋白质,可用蒸馏水擦拭后再擦干。按仪器说明正常关机,长期不用时需定期维护(如清洁光学部件)。基于比尔-朗伯定律,通过测量样品溶液对特定波长光的吸收程度,从而确定样品中某种物质的浓度。南京微量微量分光光度计代理商

面对珍稀样本或高通量筛查中成本控制的需求,现代全波长微量分光光度计实现了性的超微量检测。其采用的微流体技术或特殊的样品承托表面(如接触式检测),可将所需样本体积降低至0.5μL甚至更低。这意味着,一次普通的穿刺取液即可完成多次检测,极大节约了宝贵的生物样本,如经过多轮扩增的PCR产物、提取困难的微量RNA或珍贵的重组蛋白。尽管体积微小,但通过精密的温控系统与光学校正算法,仪器依然能保证高度的准确性与重复性,浓度检测下限可达ng/μL级别。此功能特别适用于转基因动物模型取样、单细胞组学样品质检、临床穿刺液分析以及任何样本量受限的前沿研究领域,实现了“小体积,大数据”的科研目标。南京微量微量分光光度计代理商在酶活性测定中,利用荧光底物被酶催化后产生荧光变化来定量酶的活性。

在使用微量分光光度计检测核酸(DNA/RNA)时,波长的选择需结合核酸的固有光学特性、纯度评估需求及干扰因素排除,**目标是精细定量核酸浓度并判断样品纯度。核酸定量的**波长:260nm核酸(DNA和RNA)的嘌呤和嘧啶环结构在260nm紫外光下有**强吸收峰,这是定量的关键依据:原理:根据朗伯-比尔定律,吸光度(A260)与核酸浓度成正比,仪器通过预设的吸光系数(如双链DNA的吸光系数为50μg/(mL・cm))计算浓度。适用场景:所有核酸的浓度定量(包括dsDNA、ssDNA、RNA),是必须检测的基础波长。
样本制备:避免气泡:气泡会导致光散射误差,需用移液器轻柔滴加样本至检测探头。杂质过滤:悬浊液(如细胞裂解液)需离心(12000rpm×5min)或 0.22μm 滤膜过滤,减少颗粒干扰。仪器校准:每次检测前用超纯水(或空白缓冲液)进行基线校准,消除背景吸光度。定期用标准品(如 10mg/mL 牛血清白蛋白)验证仪器准确性。波长选择策略:未知样本优先全波长扫描,确定特征吸收峰后再定点定量。避免选择吸光度过高(A>2.0)或过低(A<0.1)的波长,以防超出线性范围。微量分光光度计通常简称为微光光度计,或在某些特定上下文中直接称为分光光度计。

样品用量与质量严格控制样品体积(1-2μL,过多易溢出污染仪器,过少可能形成不完整液柱,导致结果偏差)。避免样品中含气泡、油脂、核酸酶等,否则会干扰检测或损坏探头。校准与空白对照每次实验前必须用与样品溶解相同的缓冲液做空白校准(如 RNA 用 RNase-free 水,DNA 用 TE 缓冲液),否则会导致浓度计算误差。定期用标准品(如已知浓度的 DNA 标准溶液)验证仪器准确性(建议每 3-6 个月一次)。纯度比值的正确解读A260/A280 和 A260/A230 为 “相对纯度指标”,不能完全替代琼脂糖凝胶电泳(检测核酸完整性)或 SDS-PAGE(检测蛋白质污染)。高浓度样品(如 > 500ng/μL)的比值可能不准确,建议稀释后重新检测。探头维护探头是部件,需避免刮擦、碰撞,禁止用硬物(如棉签)擦拭,可用清洁纸或镜头纸轻轻擦拭。若检测含强腐蚀性或高盐样品后,需立即用蒸馏水清洁探头,防止腐蚀。数据重复性验证对重要样品建议重复检测 2-3 次(每次更换新的样品液滴),取平均值(偏差应 < 5%),避次操作误差。纯度评估:根据核酸在 260nm 与 280nm 波长处吸光度的比值,判断是否存在蛋白质、酚类等杂质污染。南京微量微量分光光度计代理商
食品检测:检测食品中的营养成分、添加剂、污染物等,确保食品安全。南京微量微量分光光度计代理商
微量分光光度计凭借其微量取样、快速检测、多参数分析等优势,广泛应用于生物医学、分子生物学、药物研发、临床检测等领域。以下是其**应用场景及具体用途:核酸检测与分析浓度定量:检测 DNA/RNA 提取物(如质粒、基因组 DNA、RNA 测序样本)的浓度,默认转换系数适用于 dsDNA(50 ng/μL・OD₂₆₀)、RNA(40 ng/μL・OD₂₆₀)等。纯度评估:通过 A₂₆₀/A₂₈₀ 比值判断蛋白质污染(纯 DNA≈1.8,纯 RNA≈2.0),通过 A₂₆₀/A₂₃₀ 比值评估盐离子或有机物污染(理想值>2.0)。实验质控:PCR、qPCR、基因编辑(如 CRISPR)前确保模板浓度均一,避免实验误差。南京微量微量分光光度计代理商