ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端处理上的主要不同点如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**:-**ExoIII**:适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:适底物是5'磷酸化的双链DNA,对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**:-**ExoIII**:对具有3'-突出末端(至少有4个碱基,且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**:对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍;对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**:-**ExoIII**:可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端)。

Taq DNA Polymerase:科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3'→5'校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。Recombinant Human OSMR&GP130 Protein,His and Flag Tag这种特性尤其适用于复杂模板(如高GC含量或低丰度基因)的扩增,以及对特异性要求较高的实验场景。

Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一种专为血液样本直接PCR扩增设计的即用型预混液,能够直接从全血样本中进行基因扩增,无需进行复杂的DNA提取和纯化步骤。产品特点该预混液含有经过基因工程改造的耐血DNA聚合酶(如HemoTaq™ DNA Polymerase),这种聚合酶对血液中的血红素及其他PCR抑制剂表现出很强的耐受性,能够直接用于EDTA、肝素或柠檬酸钠抗凝血样本的检测。此外,该预混液能够扩增长达5 kb的DNA片段,并且对不同抗凝剂处理的血液样本均表现出良好的兼容性。预混液的无染料配方使其适用于多种后续应用,如凝胶电泳分析、测序或克隆,而无需担心染料对结果的干扰。应用场景Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 广泛应用于抗凝血样本中基因组DNA的直接扩增、基因分型、微生物检测(如细菌、病毒)以及基因敲除或转基因小鼠的基因型分析。其耐血能力可达20%-50%,在20 μL的PCR体系中,通常可加入1-4 μL的全血样本。此外,该预混液适用于多种抗凝剂处理的血液样本,但优先推荐使用EDTA抗凝血,因为EDTA可以更好地抑制核酸降解。
Pfu DNA聚合酶是一种从嗜热古细菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其准确性和热稳定性而被广应用于分子生物学研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,这种独特的校正功能使其能够在DNA合成过程中纠正错误掺入的碱基,从而提高扩增的保真性。与Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的错误率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。这种高保真性使其成为需要准确扩增的实验(如基因克隆、突变研究和测序准备)的理想选择。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的热稳定性,能够在95°C的高温下保持活性,适合PCR反应的高温变性步骤。其扩增产物为平末端,适用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶扩增的DNA片段不适合常规的T载体克隆。Pfu DNA聚合酶的应用领域广,包括高保真PCR、基因克隆、点突变、全基因合成以及高质量测序样本的准备。它还常与其他酶(如Taq酶)联合使用,以结合高保真性和快速扩增的优点。总之,Pfu DNA聚合酶凭借其高保真性、热稳定性和广的应用场景,已成为分子生物学实验中不可或缺的工具,为科学研究提供了强有力的支持。Phusion DNA Polymerase是一种高性能的热稳定DNA聚合酶,以其高保真度快速扩增和稳健反应而闻名于科研领域。

在PCR产物的克隆中,Lambda核酸外切酶(λExonuclease)有其特定的应用和优势,但它不能完全替代其他酶。以下是一些替代酶和它们的特点:1.**ExonucleaseIII(ExoIII)**:-ExoIII具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,尤其适合双链DNA的平末端、5'-突出末端或切口,从DNA链的3'-端释放5'-单磷酸核苷酸,产生单链DNA片段。-与Lambda核酸外切酶相比,ExoIII对具有3'-突出末端的DNA有活性,而Lambda核酸外切酶则对5'-磷酸化的双链DNA有更高的活性。2.**TaqDNA聚合酶**:-在平端克隆中,可以使用TaqDNA聚合酶和dATP进行“3'dA加尾”,以提高连接效率。-这种方法通过在PCR产物的3'端添加突出的腺嘌呤(dA),增加了与载体连接的可能性,从而提高克隆效率。3.**TOPO克隆载体**:-TOPO克隆载体含有共价连接的DNA拓扑异构酶I,可同时作为限制性内切酶和连接酶。-与传统PCR克隆载体相比,TOPO克隆载体具有更短的连接反应时间、更高的克隆效率以及更简单的分子克隆实验方案。综上所述,虽然Lambda核酸外切酶在特定情况下非常有用,但它不能完全替代其他酶。每种酶都有其独特的特性和应用场景,选择合适的酶取决于具体的克隆需求和实验设计。中间的催化结构域以及 C 端结构域,这种多结构域的组成使 Tn5 转座酶能精细地与 DNA 相互作用并发挥其功能。Recombinant Human OSMR&GP130 Protein,His and Flag Tag
Ultra-Long Master Mix (2×)(Without Dye)采用2×浓度的预混液形式,使用时只需加入引物和模板即可进行反应。Recombinant Human APOH Protein,His Tag
Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 是一种专为长片段PCR扩增设计的即用型预混液,含有经过配体修饰的热稳定Taq DNA聚合酶、优化的缓冲体系以及荧光染料,能够有效扩增长达25 kb的基因组片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。产品特点该预混液融合了3'-5'校正活性因子,能够明显提高扩增产物的准确性和特异性。其优化的缓冲体系和扩增因子使其在长片段扩增中表现出色,即使对于高GC含量或复杂结构的模板,也能实现高效扩增。此外,预混液中添加的染料使得PCR产物可以直接进行电泳检测,无需额外添加上样缓冲液。应用场景Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 广泛应用于基因组学研究、复杂基因组区域的扩增以及基因克隆等领域。它特别适合填补基因组缺口、端粒到端粒(T2T)基因组组装以及长片段测序模板的制备。其3'端带A的扩增产物还可直接用于T载体克隆。总之,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 凭借其长片段扩增能力和便捷的操作流程,为复杂基因组研究提供了高效、可靠的解决方案,是分子生物学实验室的理想选择。Recombinant Human APOH Protein,His Tag
重组人ITK蛋白(Interleukin-2-inducible T-cell kinase)是一种重要的非受体酪氨酸激酶,主要在T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)和肥大细胞中表达,广参与T细胞受体(TCR)信号通路的启动与调控。ITK在T细胞活化、分化、细胞因子分泌及免疫应答中发挥关键作用,是适应性免疫系统中不可或缺的信号分子。该重组ITK蛋白融合了GST标签(谷胱甘肽S-转移酶标签),通过原核或真核表达系统制备,具有良好的溶解性和稳定性。GST标签不仅便于通过谷胱甘肽亲和层析进行高效纯化,还可用于蛋白-蛋白相互作用研究、激酶活性检测及药物筛选等实验。融合标签的设计提高了蛋白的可操作性,使其在...