生物分子学是研究生命体系中分子结构、功能和相互作用的学科。接下来就让上海东寰为您分享。它是生物学、化学和物理学的交叉学科，是现代的生命科学的重要组成部分。生物分子学的研究范围非常广，包括蛋白质、核酸、糖类、脂质等生物分子的结构、功能和相互作用等方面。蛋白质是生物分子学中重要的研究对象之一。蛋白质是生命体系中基本的分子，它们参与了几乎所有的生物过程。蛋白质的结构和功能密切相关，因此研究蛋白质的结构和功能对于理解生命体系的基本原理非常重要。生物分子学家们通过各种手段，如X射线晶体学、核磁共振等技术，研究蛋白质的结构和功能，为药物研发、生物工程等领域提供了重要的基础。核酸是生物分子学中另一个...

所以可以用于研究药物对急性胰腺炎的影响。大鼠卵巢切除（OVX模型）大鼠卵巢切除术是对人类绝经后骨质疏松的模拟。为了构建大鼠的动物中老年骨质疏松模型，亦是使用很普遍且研究很多的实验用骨质疏松症动物模型。大鼠进入动物房后饲养一周让其适应环境后再开始实验，麻醉，备皮，从大鼠侧背部开口找到卵巢，结扎子宫，切除卵巢层层缝合即可。大鼠前交叉韧带切除造骨关节炎模型（OA模型）骨关节炎是一种慢性，渐进性，退行性关节病变，是临床上很常见的关节疾病。而切除前交叉韧带的方式可以为进行骨关节炎防治提供理论依据。大鼠进入动物房后饲养一周让其适应环境再开始实验。麻醉，备皮，沿着膝盖侧部开口，打开关节腔，剪断前交叉...

整体课题实验设计服务（DH0029）一、服务介绍东寰生物不*拥有经验丰富的技术团队，为您提供专业技术咨询，根据您的“实验目的”、“研究方向”，结合分子生物学、细胞生物学、蛋白免疫学，免疫学，微生物学为您量身设计切实可行的实验方案。而且东寰售后团队为您及时解决对实验设计、实验过程、结果分析的各种疑问，为您书写SCI文章提供坚实的基础。欢迎您来电咨询。二、服务内容1.科研课题整体设计2.预实验3.实验正式开展4.实验结果分析处理5.提交客户三、客户提供1.客户提供课题思路四、我们提供1.预实验相关数据和结果2.正式实验报告及相关数据3.数据分析及结果处理数据五、服务项目说明1.实验周期：具...

把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞漂起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热完全培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱离瓶壁形成单细胞悬液，离心，小心移除上清；3、加入5ml预热完全培养基，吹打重悬细胞用细胞计数板在显微镜下计算细胞数，分装入T25培养瓶中，添加基至总体积为5ml，置于37℃、5%CO2培养箱中培养；传代1次。注意事项1.熟知所养细胞的生长密度极限；2.进行所养细胞传代时，消化时必须把培养瓶置于倒置显微镜下观察，并记录所需时间，下次按照该时间执行即可；3.进行细胞传代时必须结合考虑细胞生长密度需求（启动正常生长所需的密度...

建立疾病模型的目的是为了防治人类疾病。因此，疾病模型研究结果的可靠程度取决于模型与人类疾病的相似或可比拟的程度。接下来就让上海东寰带您了解相关知识一个好的疾病模型应具有以下特点：①能够再现所要研究的人类疾病，动物疾病表现应该与人类疾病相似；②动物能重复产生该疾病，尽可能能在两种动物体内复制该病；③动物背景资料完整，实验动物合格，生命周期要满足实验需要；④动物要价廉、来源充足、便于运送；⑤尽可能选用小动物。生物医学科研专业设计中常要考虑如何建立动物模型的问题，因为很多阐明疾病及疗效机制的实验不可能或不应该在患者身上进行。常要依赖于复制动物模型，但一定要进行周密设计，设计时要遵循下列一些原...

原代细胞技术服务大类技术名称价格细胞培养技术细胞培养500元/周细胞复苏、冻存187元/支细胞鉴定免疫荧光125元/样，拍照，50元/组（基因、核）细胞流式检测单标62元/样，双标100元/样细胞药理细胞毒理1125元/板(MTT、CCK8法)人源细胞人脐静脉内皮细胞HUVECs3750元人脐动脉内皮细胞HUAECs3750元人脐静脉血管平滑肌细胞HUVSMCs2500元人脐动脉血管平滑肌细胞HUASMCs2500元人脐间（华通胶）充质干细胞HUSMC；4375元大鼠细胞大鼠心肌细胞SD-CMs3125元大鼠心肌成纤维细胞SD-CFs1875元大鼠心外膜细胞SD-ECs2500元大鼠主...

4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,／LPBS缓冲液。2、染色方法a,取出培养有细胞的盖玻片，用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛试问固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min，PBS洗两次，5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室温封闭30min-1h。e.去封闭液，直接加入一抗，37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。，10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗，37℃，孵育1h。，10min/次，用滤纸吸干。(PBS配制)封片。j.免疫荧光显微镜下观察，或于4℃...

随着社会的发展，身体健康成为民生重点关注热点，从人体上看疾病远远不能确定病情的症状及疾病的医疗。所以我们可以通过动物疾病模型，去实现医学的理念。一些手术动物模型可以让我们更好地去观察以及防治某些疾病；例如：大鼠1/2切肾，可模拟临床单边肾功能缺失疾病模型大鼠1/2切肾，可模拟临床单边肾功能缺失疾病模型。大鼠在进入动物房一周后，等其适应环境再开始实验。麻醉，备皮，侧背部开口，结扎肾蒂，剪除肾脏，若无出血即为手术成功；层层缝合等其苏醒即可。1/2切除大鼠肾脏会在病程初期呈现出较强代偿性作用，但代偿性并不能满足机体需要，后期肾脏依然会持续恶化，在防御与医疗过程中可采取相关措施，从而达到有效的...

液体活检三大标志物之一的外泌体（exosomes），近几年研究热度持续攀升。有关外泌体载药、诊断、免疫疗法等方向的文章陆续发表在Science、Nature等各大期刊上，外泌体已成为生命科学/基础医学研究的一大热点。外泌体的功能外泌体可能作为细胞之间物质和信号通讯的途径，不同的细胞通过分泌携带不同组分的外泌体实现细胞间通讯，这些外泌体被受体细胞吸收，通过物质交换或释放内含物实现物质和信号的交流。外泌体与受体细胞的信息交流可能通过以下4种途径实现:外泌体表面膜蛋白质被目的细胞表面的受体识别，从而靶细胞;外泌体在蛋白酶作用下产生的表面膜蛋白质碎片可作为目的细胞表面受体的配体;外泌体脂膜可以...

把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞飘起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热完全培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱离瓶壁形成单细胞悬液，离心，小心移除上清；3、加入适量（消化前预估细胞的数量，1-2*10E6/ml冻存液）冻存液并吹打混匀，分装至冻存管中，标记冻存细胞的名称、冷冻日期、操作者姓名拼音简写，然后放入梯度降温盒（提前复温至室温），置于-80℃过夜，次晨置于液氮罐中保存。注意事项1.密切观察细胞的生长密度，当细胞密度即将达到其生长密度极限时进行换液，以便第二天进行保种；2.消化前进行冻存液配制，切勿用培养基和血清重悬细胞后...

日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体，它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能，也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后，这种差异就开始发生了。问什么是无血清培养基？与普通培养基有什么区别？答：无血清培养基(serumfreemedium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。添加组分可...

把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞飘起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热完全培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱离瓶壁形成单细胞悬液，离心，小心移除上清；3、加入适量（消化前预估细胞的数量，1-2*10E6/ml冻存液）冻存液并吹打混匀，分装至冻存管中，标记冻存细胞的名称、冷冻日期、操作者姓名拼音简写，然后放入梯度降温盒（提前复温至室温），置于-80℃过夜，次晨置于液氮罐中保存。注意事项1.密切观察细胞的生长密度，当细胞密度即将达到其生长密度极限时进行换液，以便第二天进行保种；2.消化前进行冻存液配制，切勿用培养基和血清重悬细胞后...

细胞周期和凋亡技术服务（DH0003）一、服务介绍细胞周期（CellCycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，执行一定生物学功能（G0期）。细胞凋亡（Cellapoptosis）是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的**、表达以及调控等的作...

肌动蛋白）：β-actin存在于不同类型的细胞中，分子量约为42kDa，主要位于细胞质中，是一种结构蛋白，参与细胞骨架的构建和细胞的运动等功能。（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）：参与细胞糖酵解途径中的反应，分子量约为36kDa，位于细胞质中，存在于不同类型的细胞中。tubulin（微管蛋白）：tubulin是微管蛋白家族中的一员，主要参与细胞骨架的构建，包括α和β两种亚型，α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kD和50kD,其实际检测条带均在55kD左右，位于细胞质中。2、胞白内参（定位于细胞核）主要包括以下2类：HistoneH3：是组蛋白家族的一员，主要存在于细胞核内，...

细胞转染技术服务细胞转染实验技术服务（DH0002）一、服务介绍细胞转染（Transfection）是指将DNA或者RNA导入真核细胞中的过程。转染的目的是产生重组蛋白，或特异性增强或控制转染细胞中的基因表达。常规转染技术可以分为两大类，一类为瞬时转染，一类为稳定转染（构建稳定细胞株）。二、服务内容及价格服务编号服务内容服务价格服务周期（工作日）DH0002-1瞬时转染询价7-10DH0002-2稳定转染（构建稳定细胞株）询价7-10注：瞬时转染：是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞对目的基因的表达进行检测。特点是...

如何判断是否加入了合适体积的Matrigel：我们只需用一张格子纸就能知道自己的移液调整到多少能正好把下孔填满。如上图所示，垂直透过每个孔看下面的格子纸，如果格子被缩小了，那么就说明胶没加满，格子被放大了，那么胶就加多了，格子没发生什么变形，这才是刚刚加满下孔的状态。2、凝胶1）盖上ibidi血管生成载玻片的盖子。2）准备一个10cm的培养皿，放入浸过水的纸巾，制成一个湿盒。3）将ibidi血管生成载玻片放入培养皿中，盖上培养皿盖。4）将整个培养皿放入培养箱中，静置30分钟左右，等待胶凝结。5）等待同时准备细胞悬液。3.铺细胞加入细胞的量直接影响实验结果，所以在正式实验开始之前，要对不...

使每条染色体的着丝点排列在细胞中间的一个平面上。这个平面与纺锤体的中轴相垂直，类似于地球上赤道的位置，所以叫做赤道板。分裂中期的细胞，染色体的形态比较固定，数目比较清晰，便于观察清楚。后期细胞分裂的后期，每一个着丝点分裂成两个，原来连接在同一个着丝点上的两条姐妹染色单体也随着分离开来，成为两条子染色体。纺锤丝牵引着子染色体分别向细胞的两极，使细胞的两极各有一套染色体。这两套染色体的形态和数目是完全相同的，每一套染色体与分裂以前的亲代细胞中的染色体的形态和数目是相同的。末期当这两套染色体别到达细胞的两极以后，每条染色体的形态发生变化，又逐渐变成细长而盘曲的丝。同时，纺锤丝逐渐消失，出现新...

1、取新鲜抗凝全血（EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝血均可）或者去纤维蛋白血液，用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。2、取一支无菌离心管，先加入试剂A，再加入试剂D，使两者形成梯度界面（试剂A：试剂D的体积比为3：2，如稀释后的血液样本小于5ml，则先后加入3ml试剂A和2ml试剂D；如稀释后的血液样本大于5ml，试剂总量与稀释后的血液样本量相等），两种试剂的分层一定要清晰。3、将稀释后的血液平铺到分离液液面上方，注意保持两液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后将血液小心的平铺于分离液上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。如果样品较多，加样的时间较长，在离心之前...

细胞内吞检测细胞内吞检测服务（DH0013）一、服务介绍1)无菌条件下，将DiI-LDL用细胞培养基稀释至25-50µg/ml。2)加入活细胞内，37℃培养4-5小时。3)孵育结束，吸去含有HumanDiI-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。4)细胞固定5)荧光显微镜拍照二、服务内容及价格服务编号服务内容服务价格服务周期（工作日）DH0013细胞内吞检测服务（DIL-Ac-LDL）咨询咨询三、客户提供1.符合实验要求的细胞药品（包括说明书）（可代为购买）,若无任何说明，默认由本公司提供。四、提交给客户结果1、完整实验报告一份，包括实验流程、数据和图片等2、结果分析报告五、服务项...

整体课题实验设计服务（DH0029）一、服务介绍东寰生物不*拥有经验丰富的技术团队，为您提供专业技术咨询，根据您的“实验目的”、“研究方向”，结合分子生物学、细胞生物学、蛋白免疫学，免疫学，微生物学为您量身设计切实可行的实验方案。而且东寰售后团队为您及时解决对实验设计、实验过程、结果分析的各种疑问，为您书写SCI文章提供坚实的基础。欢迎您来电咨询。二、服务内容1.科研课题整体设计2.预实验3.实验正式开展4.实验结果分析处理5.提交客户三、客户提供1.客户提供课题思路四、我们提供1.预实验相关数据和结果2.正式实验报告及相关数据3.数据分析及结果处理数据五、服务项目说明1.实验周期：具...

5）转染6-8h后更换7ml不含双抗的新鲜培养基（DMEM+10%FBS）。（此时弃去的培养基中已含有少量的病毒，废液以及所用的移液枪头必须经处理后才能丢弃）（6）换液后48h，用移液枪从培养皿的一侧收集上清液到15mL离心管，3000r/min离心5min并用，过滤后的细胞上清液如果暂时不进行进一步处理，可分装后置于-80℃冰箱保存。注意：通常细胞转染24h后就可以看到荧光蛋白的表达，293T细胞会明显的皱缩成圆形，48h可以进行荧光照片的采集，判断转染效率。一般为了能获得高滴度的病毒，需要通过不断优化条件，提高转染效率。优化条件包括：细胞培养条件，转染试剂的优化，三质粒比例的优化（...

前几个循环的退火温度设定为，比引物的退火温度（Tm）再高几度。较高的退火温度能有效减少非特异性扩增，但同时较高的退火温度会加剧引物与目标序列的分离，导致PCR的产量降低。因此在开始的几个循环中，退火温度通常设置为每个循环降低1℃，以增加体系中目的基因的含量。当退火温度降低到温度时，剩余循环都维持此退火温度。通过这种方法，在PCR过程中，所期望的PCR产物得到有选择性的增加，而几乎不会出现非特异性的产物。注：通过以较高的温度起始，再随着循环逐渐降低到退火温度（黑色曲线），这种PCR方法可提升反应特异性（黄色曲线）。目标扩增子的产量（绿色曲线）相应的得到富集。7、直接PCR直接PCR是指直...

这期上海东寰主要给大家讲解一下几种常见的流式检测。欢迎大家的查阅！1、免疫细胞分型:随着基因表达技术的诞生，新的单抗以及荧光素的获得，同一样本检测多个marker（很常见的人外周血免疫细胞分型），或者多个参数确定目的细胞（如Treg细胞）通过多色流式得以实现。基于流式细胞术的多指标高通量检测特点，同样也能实现对多种胞内或胞外细胞因子的检测，很大程度的节省样本量，缩短人工操作时间，做到准确定量分析。2、免疫功能检测(胞内细胞因子/胞外多因子检测)：细胞因子作为细胞间信号传导的分子，主要介导和调节免疫应答及炎症反应，通过调节免疫促进与免疫压制的动态平衡，维持机体免疫系统的稳定。检测细胞因子...

随着社会的发展，身体健康成为民生重点关注热点，从人体上看疾病远远不能确定病情的症状及疾病的医疗。所以我们可以通过动物疾病模型，去实现医学的理念。一些手术动物模型可以让我们更好地去观察以及防治某些疾病；例如：大鼠1/2切肾，可模拟临床单边肾功能缺失疾病模型大鼠1/2切肾，可模拟临床单边肾功能缺失疾病模型。大鼠在进入动物房一周后，等其适应环境再开始实验。麻醉，备皮，侧背部开口，结扎肾蒂，剪除肾脏，若无出血即为手术成功；层层缝合等其苏醒即可。1/2切除大鼠肾脏会在病程初期呈现出较强代偿性作用，但代偿性并不能满足机体需要，后期肾脏依然会持续恶化，在防御与医疗过程中可采取相关措施，从而达到有效的...

细胞增殖通俗点讲，细胞增殖也就是细胞分裂，就像我们每个人的生命起点都是由一个受精卵不断的分裂而来，然后形成由非常多的细胞组成的个体，当然在增殖期间也不断有衰老和死亡的细胞出现，这就是细胞增殖。增殖是生物体生长、发育、繁殖及遗传的基础。大家了解细胞增殖说明了什么吗？细胞增殖的状态是什么样的？上海东寰给大家讲解一下。细胞增殖简单来说，只要有增殖就说明细胞还活着，所以细胞增殖是生物体的重要生命特征。科研小伙伴研究它干什么呢？举几个例子，比如某小伙伴发现了一种可能杀死肿的小分子，那如果要验证这个小分子是否有效，那就要研究加入这个小分子后的肿细胞增殖情况，又比如某个科研小伙伴突发奇想，把细胞的某...

把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞飘起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热完全培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱离瓶壁形成单细胞悬液，离心，小心移除上清；3、加入适量（消化前预估细胞的数量，1-2*10E6/ml冻存液）冻存液并吹打混匀，分装至冻存管中，标记冻存细胞的名称、冷冻日期、操作者姓名拼音简写，然后放入梯度降温盒（提前复温至室温），置于-80℃过夜，次晨置于液氮罐中保存。注意事项1.密切观察细胞的生长密度，当细胞密度即将达到其生长密度极限时进行换液，以便第二天进行保种；2.消化前进行冻存液配制，切勿用培养基和血清重悬细胞后...

ELISA检测技术服务ELISA检测技术服务（DH1006）一、服务介绍ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗原分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方...

2、目的蛋白相应一抗：请您提供质量保证的一抗（或委托我公司准备）。抗体的使用量通过预实验后进行确认，原则上不回收使用一抗。3、阳性对照样品（尽量提供）。4、相关文献（可选）。注：若要检测磷酸化蛋白，请在2-3个月内进行，因为长时间保存的样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。五、提交给客户结果1、预实验显色结果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式），预实验采取3个一抗稀释度，选取部分实验样本。2、正式实验显色结果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式）。3、完整实验报告。六、服务项目说明1、提供的蛋白量与待检测的目的蛋白数量有关，蛋白数量增加相应的样品量也要增加。2、每...

防止有Matrigel流经上孔而留下残留胶；3、需要按照细胞的生长速度定时采集图像，并且对其成管长度、覆盖面积、成环数和结点进行测量和记录，并且对其进行统计分析；4、分上下孔的ibidi血管生成载玻片能去除凹液面，使成像效果更好。（Matrigel铺在下孔，细胞铺在Matrigel上，上孔充满培养基）2、数据分析（在特定的时间点采集图片，并且进行图像分析（Wimasis全自动分析）测量小管长度，成环数，细胞覆盖面积和结点。之后在对测量结果进行统计分析以说明实验结果。）三、实验具体步骤1、准备基质胶1）实验前一天将Matrigel置于冰盒中，放入4度冰箱，使胶能过夜缓慢融化。（注意：同样...

细胞活力及毒性检测细胞活力检测技术服务（DH0005）一、服务介绍在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力。为了以下实验，我们需要对细胞做活力检测。1、由组织中分离细胞检测细胞活力以了解分离过程对细胞是否有损伤作用2、复苏后的细胞也要检测细胞活力，了解冻存和复苏的效果3、药物筛选等检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK-8法甲瓒产物的水溶性差（需加有机溶剂溶解）好好好检测灵敏度高很高很高非常高检测时间较长较短较短短检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm细胞毒性高，细胞形态完全消失很低，细胞形态不变很...