广州BD VDJ测序多重荧光免疫组化

免疫组库是功能相似的n多细胞的统称。而“免疫”是指免疫细胞，特指T/B淋巴细胞。“So~免疫组库”（Immune Repertoire，IR），指某个体，特定时间点下，所有功能多样性T/B淋巴细胞的总和。T/B细胞利用细胞表面受体（TCR/BCR）识别和结合抗原，介导机体产生针对性的免疫应答，发挥免疫功能并做好记录备案，如果该抗原再次入侵可迅速作出反应，作为健康卫士守护肌体城池。基因片段V(D)J (Variable-可变区; Diversity-多样区; joining-连接区;) 会发生随机重组，各基因片段可变形式分别为，V区（52种），D区（2种），J区（13种），配合V(D)J片段中碱基的插入和缺失，进一步相互间的排列组合存在1012种以上组合形式，以此构成了TCR和BCR多样性的来源，而这种多样性正是适应性免疫系统能够识别众多抗原的基础。烈冰开展了单细胞转录组、单细胞多组学以及空间转录组等多种产品在内的全套科研解决方案。广州BD VDJ测序多重荧光免疫组化

基于桥式PCR技术的簇生成可以将模版链迅速扩增成千上万倍，保证过程中足够的测序深度。测序时使用特殊标记的dNTP：1）碱基上通过敏感键修饰上不同的荧光基团，用于区分ATCG；2）3'端使用叠氮基团封闭，保证一次循环只上一个dNTP。每一轮循环结束时，会通过高速荧光显微镜记录荧光图像，再通入试剂除去荧光基团和叠氮基团，开启下一循环。通过分析读取同一位点的荧光，实时获取模版链的碱基序列。由于过程中使用的化学反应并不可控，随着循环数的增大会出现不同步的情况，因此Illumina的读长只能限制在200bp左右。上海BD VDJ测序分析全线搭建BD Rhapsody单细胞测序平台。

Single Cell Sequencing技术，即利用优化后的高通量测序技术（NGS，Next Generation Sequencing）分析每一个单个细胞的序列信息，从而更高分辨率地揭示细胞间的细胞差异以及其在微环境中的功能情况。那么问题来了，如何获得单个细胞？如果无法获得单个细胞这一切都是不成立的；如何获得大批量的单个细胞？单个组织细胞群体通常在百万级别以上，如果被检测的测序细胞数量过小精确度不足；如何低成本地获得大批量单个细胞？单细胞测序成本非常高，尤其是需要测2000~3000个以上的细胞的时候，如果单个细胞的分选成本也很高，技术根本无法普及。所以，正因为这些问题的存在使得高通量测序在单个细胞测序应用中的普及度一直不足，直到几个突破性技术的诞生。

单细胞转录组测序是在单细胞水平上高通量测序分析基因表达谱的技术，突破传统高通量测序的局限性，组织解离后，单个样本一次上机能捕获500-20000个细胞， 基于每个细胞分别建库测序，获得单个细胞的基因结构和基因表达状态，并鉴定细胞的类型，可以在不同样本间从细胞类型的组成和丰度角度进行比较，反映细胞间的异质性。而2021年横空出世的10X Genomics Chromium X平台实现了单块chip上的百万级别通量的细胞捕获，系统实现16个通道同时运行，每个通道可捕获2000-20000个细胞（不混样），并支持原Chromium Controller体统外的多种细胞捕获百万级别通量实验，可准确鉴别稀有细胞类型和适配大规模单细胞研究。烈冰斥巨资引进Novaseq6000，开启更大通量测序新纪元。

什么是染色质可及性？ 正常情况下，DNA与核小体缠绕折叠在一起形成染色质，但是DNA的复制、转录都是需要将染色体的高级结构解开的，然而解压并不需要将整个染色体全部打开，而只需要打开一部分，即需要表达基因的区域。这部分打开的染色质，就叫开放染色质（open chromatin）。打开染色质，允许部分调控蛋白（比如转录因子和辅因子）过来与之相结合的特性，即染色质的可及性（chromatin accessibility）。ATAC-seq（Assay for Transposase-Accessible Chromatin with highthroughput sequencing），即利用转座酶研究染色质可及性的高通量测序技术，通俗来说就是将携带测序信息的转座酶等插入开放性染色质中进行识别，进一步通过高通量测序及生物信息学分析来挖掘相关基因信息，以探究生物学相关问题。与ScRNA-Seq类似，ScATAC-seq也是在ATAC-Seq的基础上，解决不同细胞群体的异质性的问题，检出混杂样品测序所无法得到的异质性信息。单细胞测序数据分析，认准烈冰NovelBrain生物信息数据分析平台。北京BD单细胞测序公司

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reads数、基因表达量及细胞数量判定过程中：以捕获5000个细胞、100G的测序量为标准，每个细胞的reads数大约在50k左右；每个细胞的基因中位数取决于样本的细胞类型，例如成熟的B，T，粒细胞数量较多的组织中，由于该类型细胞表达的基因数普遍较少，导致基因中位数下降。而某一疾病组织、或者体外培养的如干细胞等，他们的基因表达数较高，甚至可以超过1万，这就导致该类样本基因中位数非常高。因此，我们对细胞数量以及基因中位数确认时，需要考察实际组织的细胞组成。广州BD VDJ测序多重荧光免疫组化

上海烈冰生物医药科技有限公司是一家生物科技、医药科技、信息科技、计算机科技领域内的技术开发、技术服务、技术转让、技术咨询，市场营销策划，市场信息咨询与调查（不得从事社会调查、社会调研、民意调查、民意测验），从事货物及技术的进出口业务，计算机、软件及耗材（除专控），软件开发【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司，是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。烈冰生物作为生物科技、医药科技、信息科技、计算机科技领域内的技术开发、技术服务、技术转让、技术咨询，市场营销策划，市场信息咨询与调查（不得从事社会调查、社会调研、民意调查、民意测验），从事货物及技术的进出口业务，计算机、软件及耗材（除专控），软件开发【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】的企业之一，为客户提供良好的单细胞测序，生物大数据云分析平台，空间转录组测序，单细胞多组学测序。烈冰生物不断开拓创新，追求出色，以技术为先导，以产品为平台，以应用为重点，以服务为保证，不断为客户创造更高价值，提供更优服务。烈冰生物始终关注自身，在风云变化的时代，对自身的建设毫不懈怠，高度的专注与执着使烈冰生物在行业的从容而自信。