科技的发展让单细胞测序已经应用于疾病发展过程中的关键过程和事件,如前病变向恶性的转化、恶性向转移性的发展,以及对多种用药的反应。单细胞测序技术作为一个需要将组织解离成为单细胞悬液,或者是采用细胞核捕获的策略捕获单细胞核,进而对于每一个单细胞或者细胞核进行测序得到结果的技术,其空间定位信息是丢失的。这就衍生出了一个问题就是如果单细胞A与B并不出现在一个组织区域中他们会互相影响或者转化么?免疫研究中,两个具有非常强的PDL1-PD1的配对关系的细胞在组织切片上风马牛不相及,这样PDL1-PD1的关系会生效么?烈冰单细胞多组学测序助您探究细胞类型特异性和基因调控网络特征。西安高通量测序单细胞测序百万通量平台
10× Genomics官方建议,当单细胞悬液活性低于70%时应做去除死细胞操作,并推荐使用MACS® Dead Cell Removal Kit(Miltenyi Biotec)。需要注意到,去除死细胞的操作会损失一定的细胞数量,10× Genomics和Miltenyi Biotec都没有给出单细胞悬液含有多少细胞数量才建议做去除死细胞的操作。基于烈冰多年单细胞测序实验经验,建议当细胞悬液进行质量和活性检测后,考虑对细胞活性在50%-70%的悬液进行去除死细胞的操作。而太低活性的悬液(小于30%),悬液中细胞大量死亡,可能已经丢失了原组织内的细胞比例和状态,失真严重,建议重新收集样本进行新的实验,保证数据的高质量和实验结果的准确性。苏州10X Genomics单细胞测序商业化服务烈冰一站式单细胞测序服务:立足科学研究,解码生命本质。
烈冰生物搭建近10台10XGemomics平台,目前为全国范围内的高校、医院和研究所等单位的科研学者提供鼓舞,10X微流体“双十字”交叉系统为8或16通道系统,每个通道上限可捕获20000细胞,16通道一次可检测细胞范围为百万级别的细胞水平。此外,单个细胞捕获效率高达65%,可准确鉴别稀有细胞类型,利于稀有样本或小细胞量类型样本研究;细胞可适性高,对细胞大小(直径超过40um细胞需要制备成细胞核)及类型无限制。细胞捕获周期较短,能够实现自动分离,无需人工操作,1天内可完成从细胞悬液到cDNA文库构建的所有的测序准备工作。
单细胞测序实验再样本细胞上机分选签,需要对细胞数量、细胞活性进准判断,这对Single Cell分选标记、建库、下机数据的质量都具有着决定性的作用。如若细胞计数偏高,将会影响建库的成功率;计数偏低,则会提高双细胞的比例;而细胞活率过低,就会使测序数据的利用率大打折扣,因此把好单细胞悬液质量这一关尤为重要。而在铺板过程中,由于不同操作人员手法具有不可避免的差异,不同的液体流速将直接影响单细胞的入孔效果。因此烈冰生物BD Rhapsody单细胞分选平台配套了专门定制的电动移液器,其具有Prime Treat、Cell Load、Bead Load、Wash、Lysis、Retrieval多种操作模式,来对应各种不同的操作。通过已经设定的程序来控制液体的流速,大幅度降低人为操作习惯带来的差异,保证实验操作的一致性。搭建多种测序数据的生物信息分析平台,5000+项目检验,真实可信赖。
Single Cell Sequencing技术,即利用优化后的高通量测序技术(NGS,Next Generation Sequencing)分析每一个单个细胞的序列信息,从而更高分辨率地揭示细胞间的细胞差异以及其在微环境中的功能情况。那么问题来了,如何获得单个细胞?如果无法获得单个细胞这一切都是不成立的;如何获得大批量的单个细胞?单个组织细胞群体通常在百万级别以上,如果被检测的测序细胞数量过小精确度不足;如何低成本地获得大批量单个细胞?单细胞测序成本非常高,尤其是需要测2000~3000个以上的细胞的时候,如果单个细胞的分选成本也很高,技术根本无法普及。所以,正因为这些问题的存在使得高通量测序在单个细胞测序应用中的普及度一直不足,直到几个突破性技术的诞生。测序可准确地分析基因表达差异、基因结构变异、筛选分子标记(SNPs或SSR)等生命科学重要问题。厦门上海烈冰单细胞测序
高通量测序技术是对传统测序一次突破性的改变,一次对几十万到几百万条核酸序列进行测定。西安高通量测序单细胞测序百万通量平台
烈冰与国内高校、研究所、医院和药企单位开展深度合作,服务于600+临床与研究机构,1000+客户和5000+重要科研项目,助力并联合发表300+篇CNS等国际学术期刊(不完全统计),在单细胞领域,烈冰助力用户发表单细胞文献30+篇,总IF>300+,IF>10+以上文章占比65%以上,包含Immunity、Nature Cell Biology、Nature Plants 、Advanced Science等生物领域国际主流学术期刊,已发表文章研究领域涵盖包括COVID-19研究、疾病发生转移机制,免疫研究、脑神经、白血病、胚胎发育、糖尿病、退行性疾病和植物领域研究等。西安高通量测序单细胞测序百万通量平台
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