热迁移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一种研究靶点与药物在细胞水平结合情况的技术。其原理是药物结合会改变靶蛋白的热稳定性。传统的CETSA依赖蛋白质印迹法检测,通量低。现在,通过与均相发光免疫检测(如Alpha)结合,开发出了均相CETSA(简称CETSA® HT)。该方法将细胞在不同温度下加热后裂解,使用针对目标蛋白的抗体对(偶联Alpha供体/受体珠)检测溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通过比较药物处理组与对照组的蛋白热稳定性曲线偏移,即可高通量地确认化合物是否与细胞内靶点结合,并评估结合强度。铁蛋白(Ferr)检测试剂盒(均相化学发光法)。天津诊断试剂均相发光免疫诊断试剂

相较于荧光或比色法,化学发光作为均相检测的信号系统具有多重独特优势。首先,它无需外部激发光源,从而完全避免了光源不稳定、样本自发荧光及光散射所带来的背景干扰,理论上能获得极高的信噪比和灵敏度。其次,化学发光反应产生的光子信号强度在一定范围内与反应物浓度直接相关,动态范围宽,可跨越数个数量级。再者,化学发光体系(如鲁米诺、吖啶酯)的反应动力学多样,可满足从快速闪光到持久辉光的不同检测需求。比较后,化学发光反应的启动通常由单一试剂(如过氧化氢、碱)触发,易于控制,非常适合自动化仪器上的顺序注射和即时读数。这些特性使其成为实现超灵敏、高稳健性均相检测的理想信号输出模式。浙江浦光生物均相发光解决方案均相化学发光,国家重点实验室检测平台,领航医疗新时代!

Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)技术是均相化学发光的典范。其供体珠中装载光敏剂,在680nm激光激发下,将周围环境中的氧分子转化为高能量、短寿命(约4微秒)的单线态氧。单线态氧在溶液中的扩散半径只约200纳米。受体珠中则装载了化学发光剂(通常是噻吩衍生物)和荧光接收体。当单线态氧扩散进入邻近的受体珠,会触发一系列级联反应:化学发光剂被氧化并发光,该能量随即传递给荧光接收体,比较终发射出波长更长(520-620nm)、特征更明显的荧光。这个能量转移和放大的过程,使得一个单线态氧分子能引发大量发光分子的发射,实现了信号的有效放大,因此灵敏度极高。
表面等离子体共振(SPR)是一种实时、无标记的生物分子相互作用分析技术,能提供结合动力学(kon, koff)和亲和力(KD)的精确数据。均相发光技术(如TR-FRET, Alpha)则是一种基于标记的高通量终点法或实时动力学检测。两者具有很好的互补性:SPR常用于前期的靶点-配体相互作用的详细表征和验证;而基于此验证过的相互作用对,开发出的均相发光检测方法,则可以用于后续的大规模化合物库筛选和功能学研究。将两者结合,构成了从机理研究到大规模筛选的完整工作流程。均相化学发光在个性化医疗中的应用潜力有多大?

单核苷酸多态性(SNP)分型和DNA甲基化分析是个体化医疗和表观遗传学研究的重要部分。均相化学发光技术为此提供了高通量解决方案。对于SNP分型,可采用等位基因特异性引物延伸或连接反应,将不同的碱基延伸或连接事件与不同的化学发光报告系统(如不同颜色的Alpha受体珠)关联,通过检测特异性发光信号来判断基因型。对于甲基化分析,可在亚硫酸氢盐处理DNA后,使用针对甲基化与非甲基化序列的特异性引物和探针,通过均相PCR或连接酶反应结合化学发光检测,定量特定CpG位点的甲基化水平。这些方法易于实现自动化和多重分析。精确检测,一步到位!均相化学发光,助您轻松获得可靠结果!浙江POCT产品均相发光免疫分析
均相化学发光与荧光免疫技术相比,优势在哪?天津诊断试剂均相发光免疫诊断试剂
在传染病诊断领域,均相发光技术主要用于抗原或抗体的高灵敏检测。例如,利用TR-FRET原理,可以设计检测病毒抗原的均相免疫分析。将针对病毒抗原不同表位的两种抗体分别标记供体和受体,样本中若存在病毒抗原,则形成免疫复合物并产生FRET信号。该方法快速,可用于病原体筛查。在病毒学研究中,均相发光可用于评估病毒进入(如基于荧光素酶的报告病毒)、病毒复制或抗病毒药物的效果。其高通量特性有助于快速筛选广谱抗病毒化合物。天津诊断试剂均相发光免疫诊断试剂
荧光共振能量转移(FRET)是均相发光技术中应用比较多方面的信号产生机制之一。其原理是:当一个荧光基团(供体,Donor)的发射光谱与另一个荧光基团或淬灭基团(受体,Acceptor)的吸收光谱有足够重叠,且两者距离非常接近(通常1-10纳米)时,供体的激发态能量会以非辐射方式转移给受体。在均相检测中,常将供体和受体分别标记在相互作用的生物分子对(如一对抗体、或酶与底物肽)上。当目标分子存在并促使这对生物分子结合时,供体与受体被拉近,发生有效的FRET,导致供体荧光淬灭,受体荧光增强(如果受体是荧光团)。通过监测供体与受体荧光强度的比率变化,即可高灵敏度、高特异性地定量目标分析物。25-羟基维...