细胞外泌体越来越多地被认为是影响许多病理生理过程的重要细胞替代物，包括细胞稳态、CA进展、神经系统疾病和传染病。这些行为使外泌体在疾病诊断和诊疗的临床应用中具有广阔的应用前景。许多研究表明，外泌体在用于早期疾病诊断的药物输送和循环生物标志物方面优于传统的合成载体，为现代诊疗学开辟了新领域。尽管具有这些临床潜力，但含有多种细胞成分（如核酸、蛋白质和代谢物）的外泌体具有高度异质性和小尺寸。外泌体的制备、工程和分析技术的局限性对临床转化造成了技术障碍。本文旨在对外泌体领域的生物医学应用新兴技术及其临床转化中涉及的挑战进行批判性概述。讨论了当前用于纯化和识别外泌体的方法。此外，还介绍了为增强可扩展生产和改进货物装载以及tumour靶向而开发的工程策略。阐明了外泌体的卓跃临床潜力，特别是在不同细胞来源及其在下一代诊断和诊疗平台中的应用方面。 泌体直径小于光波长的5-10倍，传统光学显微镜无法检测到，但可被荧光探针标记用荧光显微镜检测。浙江植物叶组织外泌体分离
间充质干细胞来源的外泌体(MSC-Exos)作为溃疡性结肠炎(UC)的潜在无细胞疗法而备受关注，这主要是由于其抗yan、组织修复和免疫调节特性。虽然静脉注射MSC-Exos能够在一定程度上改善UC，但口服外泌体是诊治UC等胃肠道疾病的优先方法。然而，外泌体含有易被胃肠道环境降解的蛋白质和核酸，使得口服给药难以实施。逐层(LbL)自组装技术为外泌体的口服递送提供了一种有前途的策略。因此，本研究构建了一个有效的LbL-Exos自组装系统，用于口服递送靶向结肠的外泌体以改善UC诊治。生物相容性和可生物降解的N-(2-羟基)丙基-3-三甲基铵壳聚糖氯化物(HTCC)和氧化魔芋葡甘聚糖(OKGM)多糖被用作外层以提供结肠靶向并保护外泌体免于降解。与普通外泌体类似，LbL-Exos具有相似的结构和特征，但LbL可在炎症结肠中控制释放外泌体。与静脉内给药相比，口服LbL-Exos可以使用一半数量的外泌体有效缓解UC。机制研究表明，LbL-Exos被巨噬细胞和肠上皮细胞内化，发挥抗yan和组织修复作用，从而减轻UC。此外，LbL-Exos系统能够通过抑制MAPK/NF-kB信号通路来改善UC。总的来说，我们的数据表明LbL-MSC-Exos可以在口服后缓解UC，因此可能构成未来UC诊治的新策略。 福建动物组织外泌体提取外泌体的形成始于细胞内陷，成熟于多囊泡胞内体，终于膜融合。
外泌体是肿瘤细胞与微环境之间相互通讯的重要介质。然而，外泌体在胰腺ai缺氧状态下调节tumour发展的机制在很大程度上仍然是未知的。巨噬细胞是tumour内和tumour周围醉丰富的浸润性免疫相关基质细胞，表现出不同的表型和功能。根据环境因素，巨噬细胞可以被极化为M1或M2型细胞。M1巨噬细胞是以诱导型一氧化dan合酶（iNOS）表达为特征的促炎性巨噬细胞，而M2巨噬细胞表达高水平的抗yan细胞因子（例如IL-10）和有效的精氨酸酶-1（Arg1）活性，有利于肿瘤细胞的生长。然而，巨噬细胞极化的机制在胰腺ai中仍然未知。来自上海第一人民医院的裘正军主任在CancerResearch（IF=，中科院一区）发表论文证明胰腺ai细胞来源的外泌体在缺氧微环境中表达miR-301a-3p，并且可以通过PTEN/PI3K信号通路极化巨噬细胞。巨噬细胞的极化导致体外和体内胰腺ai细胞的转移潜能增强。因此，该研究认为外泌体miR-301a-3p是一种新的介导肿瘤免疫逃避的靶标。
神经退行性疾病是醉常见的残疾原因之一，占全球疾病负担的。其中，阿尔茨海默病、帕金森病和亨廷顿病会导致认知能力下降，是个人和社会层面上醉严重的症状。痴呆症发病和进展的分子机制仍知之甚少，包括可能影响分化神经元、神经胶质细胞和神经干细胞生态位的分泌因子。在过去十年中，外泌体作为相邻细胞和远处细胞之间交换信息的新型载体受到了普遍关注。这些囊泡可以被包括神经元、神经干细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞在内的不同脑细胞产生和内化，从而影响生理和病理条件下的神经可塑性和认知功能。在这里，我们回顾了外泌体作为生物活性分子载体的作用的数据，这些生物活性分子可能参与神经退行性疾病的发病机制，并且在生物体液中可检测为痴呆症的生物标志物。 精浆外泌体与精子成熟有关，其对人类免疫缺陷病毒-1（HIV-1）感ran有抑制作用。
细胞外囊泡(EV)是纳米级颗粒，在临床领域具有巨大潜力，因为它们的生物分子特征是用于CA诊断和预后的非侵入性液体活检的关键。EVs存在于大多数体液中，因此很容易从患者身上获得，优于传统的侵入性组织活检和成像技术。然而，有一些限制因素阻碍了EV的临床使用。EV生物标志物从“实验台到床边”的转化受到目前在实验室中实施的EV分离和随后的生物标志物检测方法的阻碍。尽管目前的纯化和检测方法是有效的，但它们缺乏实用性，因为它们需要高体液量、设备可用性低、周转时间慢和成本高。对克服这些限制的技术的高需求导致了纳米技术设备的重大进步。这些设备旨在将EV分离和生物标志物检测集成到从体液中直接检测EV的一步法中。这为EV加速进入当前临床标准提供了希望。这篇综述强调了EV作为CA生物标志物的重要性、临床研究目前面临的方法学障碍以及新型纳米设备如何促进临床转化。 蔗糖密度梯度离心法根据不同物质密度分离外泌体，所获得外泌体纯度较高，但耗时、产量低。浙江植物叶组织外泌体wb检测
外泌体是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构。浙江植物叶组织外泌体分离
外泌体的异质性包括：大小异质性、含量异质性、功能异质性和细胞来源异质性。尺寸不等可能是由于MVB界膜内陷不均匀，导致液体和固体的总含量不同，外泌体可能包含由不同大小范围定义的亚群。大小异质性也会导致不同量的外泌体含量；微环境和细胞固有的生物学可能影响外泌体的含量及其生物学标志物。外泌体可含有膜蛋白、胞质和核dan白、细胞外基质蛋白、代谢产物和核酸，即mRNA、非编码RNA种类和DNA；外泌体对受体细胞的影响可以不同，因为它们的细胞表面受体表达各不相同，这样的功能性有不同的表现，1.诱导细胞存活，2.诱导细胞凋亡，3.诱导免疫调节等；异质性也可以基于外泌体的起源organ和组织，包括它们是否来自ai细胞，使它们具有独特的特性，如对某些organ的趋向性和特定细胞类型的摄取。所有这些特征的组合将有可能引起更高阶的复杂性和外泌体的异质性。 浙江植物叶组织外泌体分离
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