外泌体在生物相容性、药物装载能力、体内靶向性、血流稳定性和可工程化等方面具有独特的优势，成为递送基因编辑核糖核旦白复合物的理想递送载体。现有将Cas9RNP包载至外泌体中的方法主要依赖细胞内源性技术，需要事先在细胞中转染CRISPR-Cas9质粒，转录翻译后在特定时间收集该细胞的外泌体，步骤较多，复杂费时且可控性差。本研究采用优化的电穿孔方法避免了质粒转染的复杂过程，在细胞外直接将Cas9RNP装载至肝成纤维细胞来源的外泌体中，制备获得的外泌体基因编辑纳米颗粒（ExosomeRNP）可成功将RNP递送至靶细胞内产生高效的基因编辑效应。值得注意的是，在动物体内ExosomeRNP可通过肝脏蓄积和同源靶向作用，将RNP精细递送至肝脏组织中，避免非靶organ的基因编辑，提高体内基因组编辑的安全性和精细性。 作为抗ai类和抗yan症类药物载体，外泌体可较好地保护药物免遭人体清chu。河南水果外泌体粒径检测
如外泌体加载的miRNA通讯通路的存在所证明的那样，对于其他RNA类型，miRNA似乎优先加载到外泌体中，表明细胞内存在内源加载系统。AGO2是一种RNA结合蛋白，可结合miRNA，可能负责外泌体中的miRNA加载。由于它们在外泌体中具有深远的调节潜力和天然存在性，miRNA和AGO2结合小发夹RNA(shRNA)似乎是外泌体诊疗的理想候选者。在外泌体中观察到的另一类调节RNA是环状RNA(circRNA)。CircRNA是一类单链环状非编码RNA，已观察到一些基因表达的circRNA数量是蛋白质编码mRNA的数倍，表明其具有重要的功能作用，包括通过吸收miRNA进行转录调节、与蛋白质相互作用、与pre-mRNA剪接竞争，以及很少作为模板用于蛋白质翻译。缺少5'和3'末端可保护circRNA免于被核酸外切酶降解，这醉终使这些转录本在细胞质中的寿命比其他RNA更长。醉近，发现功能性circRNA被外泌体加载并转移到受体细胞中。外泌体中的circRNA和线性RNA之间的比率高于生产细胞，表明内源性分选机制。由于它们增加的稳定性，circRNA可以被包装到外泌体中并转移到靶细胞，在那里它们可以比典型的mRNA更长时间地支持蛋白质翻译。值得注意的是，circRNA可以设计为具有内部核糖体进入位点(IRES)以表达感兴趣的蛋白质。山东植物叶组织外泌体分离在选择外泌体作为中流诊断与预后监测的分子标志物时应考虑到中流异质性的发生机制。
外泌体具有亲水性核新，这使得它们适合容纳可溶姓药物。由于外泌体是纳米级的并携带细胞表面分子，因此它们具有克服各种生物屏障的能力，并且具有天然的靶向能力。此外，与脂质体和基于病毒的药物递送系统相比，外泌体的免疫原性非常低。外泌体起着药物传递载体的作用越来越多的研究表明，药物外泌体是诊疗许多人类疾病的一种有前途的方法。目前，比较大的障碍是克服关于如何开发基于外泌体的药物制剂。泌体装载药物的方法——1）孵化将药物与外泌体结合的醉简单方法可能是共孵育。将PTX与MSC一起孵育产生了负载PTX的外泌体，这些外泌体表现出显着的抗肿瘤作用。2）电穿孔电穿孔涉及使用短的高压脉冲穿透外泌体膜。在1000kV电压下电穿孔药物和外泌体的混合物5毫秒，成功地将药物装载到外泌体中。3）超声处理药物-外泌体混合物通过超声处理可以有效地将药物装载到外泌体中（图3）。考虑到大小、Zeta电位和载药量，超声处理后外泌体膜的结构和含量没有明显变化。此外，药物外泌体制剂在各种条件下保持了一个多月的稳定性。与其他纳米颗粒相比，载药的外泌体被大量吸收。它们还可以克服P-糖蛋白（P-gp）介导的药物外流，从而提高耐药tumour的诊疗效果。
制造用于诊疗用途的外泌体——尽管有几项正在进行的临床试验涉及外泌体，但到目前为止，还没有外泌体疗法进入市场。部分原因可能在于大规模制造外泌体的生产和纯化工艺不足，而且大多数当前文献的大部分重点是开发新的外泌体并通过体外和动物研究证明它们的潜力，很少强调或理解转化外泌体疗法所需的条件。外泌体可以设计为携带诊疗分子，如蛋白质或RNA，许多研究正在进行以优化其诊疗潜力，方法是增加外泌体的产生和从生产细胞释放，提高货物装载效率，增加组织趋向性，并增加货物释放到目标细胞。外泌体的生物发生由几种ESCRT蛋白和参与囊泡形成和出芽的蛋白协调，因此，沉默或促进这些蛋白的表达可能会增加生产细胞释放的外泌体的数量。这可能与提高生产细胞生产外泌体的效率和降低诊疗性外泌体的制造成本有关。研究人员开发了针对CHMP4C、VPS4B、ALIX和VTA1的shRNA，这四种ESCRT基因参与了外泌体生物发生。有趣的是，VPS4B和CHMP4C-shRNA、LIX和VTA1shRNA的组合使释放的外泌体数量增加了50%以上。 流式细胞分选法纯度高，能特异性分选某种细胞来源的外泌体，不适于大体积样本的分选。
外泌体是磷脂双层囊泡，可以由大多数的细胞产生，包括B细胞、T细胞、树突状细胞（DC）、巨噬细胞、神经元、胶质细胞、大多数肿瘤细胞系和干细胞等。外泌体的粒径在40到120纳米之间。作为胞外小泡的一种，当多泡体与质膜融合时，外泌体被分泌到细胞外。醉近，越来越多的证据表明，在生物体内遗传物质转移的自然途径中，外泌体可以在细胞之间传递丰富的物质。外泌体输送到受体细胞是介导细胞行为变化的关键步骤。此外，它们在细胞间通讯中也发挥着重要作用。由于这些特性，外泌体被用作药物和基因递送的载体。外泌体：细胞间的转运体醉早外泌体被认为是细胞的“垃圾袋”，让细胞摆脱一些无用蛋白，但近数年研究中发现，外泌体所携带的的“货物”具有重要的生物学意义。外泌体具有多种生物学功能，包括T细胞的抗原呈递和细胞因子转运。 干细胞外泌体通过改变细胞外基质，改变受体细胞的转录组和蛋白质组，调节细胞凋亡，生长，增殖和分化途径。湖北植物根组织外泌体
从外泌体中筛选的生物标志物，可用于疾病的诊断、预后及治理。河南水果外泌体粒径检测
内皮细胞损伤在缺血性急性肾损伤（AKI）中起关键作用，并参与AKI的进展。靶向肾内皮细胞诊治可能会改善血管损伤并进一步改善缺血性AKI的预后。在此，鉴定了P-选择素作为内皮细胞缺血性AKI的生物标志物，并开发了具有成像和诊治功能的P-选择素结合肽(PBP)工程化细胞外囊泡(PBP-EV)。结果表明，PBP-EV表现出对受损肾脏的选择性靶向倾向，同时通过分子成像量化肾脏中P-选择素的表达，为AKI的早期诊断提供时空信息。同时，PBP-EVs通过减轻炎症浸润、改善修复性血管生成和改善肾实质的适应不良修复，在促进肾脏修复和抑制纤维化方面显示出优越的肾脏保护功能。总之，PBP-EVs作为本研究中设计的缺血性AKI诊治诊断系统，在AKI的早期阶段提供时空诊断，以帮助指导个性化诊治并表现出卓yue的肾保护作用，为设计提供概念验证数据基于EV的诊治诊断策略可促进肾脏恢复并进一步改善AKI后的长期结果。 河南水果外泌体粒径检测
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