磁珠分选th17细胞

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。本panel可检测因子：IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-8,IL-10,IL-12p70,TNF-α 种属：Non-human Primate。磁珠分选th17细胞

本panel可检测以下因子：BAFF/BLyS/TNFSF13B,C-ReactiveProtein/CRP,CA125/MUC16,N-Cadherin,CCL1/I-309/TCA-3,CCL4/MIP-1beta,CCL18/PARC,CCL19/MIP-3beta,CCL22/MDC,CCL26/Eotaxin-3,CCL28,CD27/TNFRSF7,CD30/TNFRSF8,CD40/TNFRSF5,CD40Ligand/TNFSF5,CD163,CD25/IL-2Ralpha,CEACAM-5/CD66e,CollagenIValpha1,ComplementFactorD/Adipsin,CystatinC,DcR3/TNFRSF6B,DR3/TNFRSF25,EMMPRIN/CD147,Enolase2/Neuron-specificEnolase,EphA2,Fas/TNFRSF6/CD95,Ferritin,Follistatin-relatedGeneProtein/FLRG,Galectin-1,GranzymeB,IFN-alpha,IGFBP-1,IGFBP-4,IL-8/CXCL8,IL-10,IL-16,IL-21,MMP-2,MMP-7,MMP-8,MMP-10,MMP-12,PDGF-AA, 2G7/PAF-AH/Lp- 2,E-Selectin/CD62E,TfR(TransferrinR),UCH-L1/PGP9.5,ULBP-4/RAET1E种属：Human流式细胞分选图本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-10,IL-1β,IL-6,TNF-α,IL-17A 种属：Mouse。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。本panel可检测以下因子：Akt2 (total),Akt2 (Ser474) 种属：Human,Mouse,Rat。

多重荧光免疫组化技术优势1.由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的用量，节约抗体，实测确实可以提升抗体的稀释比例。3.荧光法多重免疫组化，可同时进行五个颜色通道以上，这种情况下发射光谱会重叠，我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系，从而极大地节约珍贵的样品。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。结核抗体芯片监测

本panel可检测以下因子：Caspase-3,p53,PARP 种属：Human。磁珠分选th17细胞

本panel可检测以下因子：CCL2/JE/MCP-1,CCL3/MIP-1alpha,CCL4/MIP-1beta,CCL5/RANTES,CCL11/Eotaxin,CCL19/MIP-3beta,CCL20/MIP-3alpha,CD40Ligand/TNFSF5,CXCL1/GROalpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRObeta/MIP-2/CINC-3,CXCL10/IP-10/CRG-2,EGF,FGFbasic/FGF2/bFGF,Flt-3Ligand/FLT3L,G-CSF,GM-CSF,GranzymeB,IFN-alpha2/IFNA2,IFN-beta,IFN-gamma,IL-1alpha/IL-1F1,IL-1beta/IL-1F2,IL-1ra/IL-1F3,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-9,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-17/IL-17A,IL-17E/IL-25,IL-33,Lymphotoxin-alpha/TNF-beta,PD-L1/B7-H1,PDGF-AA,PDGF-AB/BB,TGF-alpha,TNF-alpha,TRAIL/TNFSF10,VEGF种属：Human磁珠分选th17细胞

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