培养基的实验室制备:―般要求:正确制备培养基是微生物检验的好基础步骤之一,使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。如重量(体积)、pH制备日期、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照配方准确配制,并记录相关信息,如:培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便溯源。培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。贵州培养基制备器安装调试
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题:在此种情况下,建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。广西全自动培养基制备器低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂,因此,配制培养基时要掌握营养物质的浓度。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要对其进行消毒处理,普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备,如无特殊要求,可用于灭菌。一些热成分,如碳水化合物,应该单独制备20%或更多的浓缩液,过滤或间断杀菌,然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下,明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后,加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基,都要仔细检查,如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等,要进行筛选和弃置,才能确定pH值。培养基培养一晚,若有细菌生长,培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基,24h培养,对生长不良或无菌的菌株进行培养,追踪其产生原因,并反复接种。如不发生变化,应丢弃培养基,禁止使用。
培养基的实验室制备:1.水:除特定要求,实验室用水的电导率在25℃下应不高于25uS/cm(相当于电阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染应不超过103CFU/mL,较好低于102CFU/mL。应根GB/T5750.12或其他有效方法,定期检验微生物的污染。2.称量和复水:称量所需量的脱水培养基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物质的培养基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培养基结块)后再加水至所需的量。3.溶解和分装:脱水培养基加水后适当加热,并不搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热溶解前应浸泡几分钟。培养基制备器内部的管道和容器可以更换,方便移除和清洗。
液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。培养基的配制:配料:配方换算→在容器中加入少量水→按照配方称取各种药品,依次加入→加足所需水量一药一勺,取药后立即盖上瓶盖。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或的1NNaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。培养基的实验室制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。贵州培养基制备器安装调试
固体培养基,一类配制成的固体状态的基质。贵州培养基制备器安装调试
制备的方法和注意事项:1培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,好终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。贵州培养基制备器安装调试
培养基的称量和溶解:小心称量所需量的脱水合成培养基(必要时佩戴口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有有毒...
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