灭菌器的使用方法：压力蒸汽灭菌器：加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。灭菌器下用煤气或电炉等加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，否则压力表上所示压力并非全部是蒸汽压力，灭菌将不完全。待冷空气全部排出后(即水蒸气从排气阀中连续排出时)，关闭排气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时(一般是101.53kPa，即15磅/英寸2，温度为121.3℃)，调解炉火，保持压力和温度(注意压力不要过大，以免发生意外)，维持15~30min。压力蒸汽灭菌器：在一定压力下产生的蒸汽湿度高、穿透力强，能够迅速有效地杀灭微生物。中国香港柜式灭菌器
高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。简而言之：灭菌温度越低,需要的灭菌时间越长；灭菌温度越高,需要的灭菌时间越短。压力蒸汽灭菌的时间，要从灭菌器柜室内达到灭菌要求温度时算起，直至灭菌完成为止。总时间包括：1、热力穿透时间。即从消毒柜内达到灭菌温度至消毒物品中心部位亦达到灭菌温度所需时间。时间的长短取决于消毒物品的性质、包装的大小,放置位置和高压锅内空气排空程度和灭菌器的种类。2、消毒维持时间。即杀灭微生物所需的时间，一般用杀灭脂肪嗜热杆菌芽胞所需时间来表示。在115℃时需30分钟，121℃时需12分钟，132℃时需2分钟。3、安全时间。一般为维持时间的一半，其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。重庆全自动灭菌器热辐射灭菌器的工作原理是利用热辐射的热能达到灭菌目的。
循环错误包括选择错误的高压灭菌器循环。中断干燥周期或选择不符合制造商书面使用说明（IFU）且不足的干燥时间。此外，在建议的冷却时间过后从高压灭菌器中取出包装可导致包装上凝结。冷却时间结束后，从高压灭菌器中取出的包装不得放置在冷/固体表面上，因为这也可能导致包装上凝结。湿包是可以并且应该避免的常见问题。如果出现湿包装对包装进行彻底的重新处理并采取纠正措施。成功的灭菌取决于在建议，IFU和法规的指导下进行灭菌之前，之中和之后可重复的标准化步骤。
压力蒸汽灭菌采用湿热灭菌法，在同样温度下，湿热的杀菌效果比干热好，有以下原因：蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量越大，发生凝固所需的温度越低。湿热灭菌时的菌体蛋白质可吸收水分，因而比在同一温度的干热空气中更易于凝固。湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，进一步提高温度。在同一温度下，湿热灭菌所需时间比干热短。湿热气体的穿透力比干热气体强，故湿热比干热收效好。高压蒸汽可以杀死一切微生物，甚至包括细菌的芽孢，的孢子等耐高温的个体。灭菌的蒸汽温度随蒸汽压力增加而升高，通过增加蒸汽压力，灭菌时间可被缩短。因此它是一种很有效，使用很较广的灭菌方法。灭菌器安全注意事项：使用蒸汽无法渗透的材料包裹灭菌对象，会影响灭菌效果。
在使用高压灭菌器时，一定要注意：1、有些材质的塑料不能高压灭菌，操作前请确认。灭菌时容器的盖子要松开，以免瓶中压力增大，塑料离心管盖子太紧灭菌后空气骤冷时真空会造成离心管变形。2、某些成分的溶液高温高压灭菌会造成物质沉淀、变色和分解，灭菌前请确认该溶液的正确除菌方式。3、灭菌的溶液在试剂瓶中不能装得过满以免中途喷洒。4、使用前一定要亲自看看锅内的水是否足够。5、将高压锅盖和锅体对齐后才能扣上螺丝。6、等待热蒸汽排出冷空气的过程中不要走开干别的事情，一定要等蒸汽排出将排气阀打下后才离开。7、建议根据灭菌所需时间设置定时器，及时提醒操作者。8、消毒完毕等压力降为零后才能将排气阀打开放气，不能急于排气，人为降压，否则会造成已灭菌的PBS等液体重新沸腾甚至喷射出。9、取出已消好毒的物品时一定要带好手套防止烫伤。10、平时注意保护好高压锅盖的垫圈，注意是否有异物粘连，如有异物要及时清理，否则会导致蒸汽泄漏。高压灭菌器的正确使用方法是消毒物品的初步处理。河南生产研发灭菌器
压力蒸汽灭菌设备：预真空蒸汽灭菌器、高压蒸汽灭菌器、自动高压蒸汽灭菌器。中国香港柜式灭菌器
高压蒸汽灭菌器的注意事项：排尽空气，使用高压蒸汽灭菌器时，很关键的是将锅内空气排尽。如锅内有空气，则气压针所指的压强不是饱和蒸汽产生的压强。相同的压强，混有空气的蒸汽其温度低于饱和蒸汽所产生的温度。因此完全排除锅内空气使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。关阀再通电后，压力表上升达到0.1MPa时，开始计时，维持压力到指定的时间。其他：含有盐分的液体漏出或溢出时，一定要及时擦干净，沿着盖子的密封圈要彻底擦干，否则会腐蚀容器和管道。不要在性气体附近使用仪器。中国香港柜式灭菌器
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