培养基的实验室制备:①概述:培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如,含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感,应在煮沸后快速冷却,避光保存。同样,一些试剂则不需要灭菌,直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明)。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL,要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注:大容量培养基(>1000mL)灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却,防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基(如含亮绿的培养基)是非常重要的。培养基制备器不要过早打开灭菌锅,要等灭菌锅内气体和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。河北Systec培养基制备器
培养基的实验室制备:1.过滤灭菌:过滤灭菌可以在真空负压或正压条件下进行。使用无菌设备和0.2um孔径的滤膜。将过滤装置的各个部分消毒灭菌,或使用预消毒设备。一些滤膜上附着蛋白质或其他物质()。为达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。2.监测:应对经湿热或过滤灭菌的培养基进行监测,尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测。添加剂的制备:制备含有有毒物质(生素)时应小心操作,避免因粉末的扩散造成实验人员过敏或发生其他不良反应。采用适当的预防措施并小心按照产品使用说明操作。安徽琼脂培养基 培养基制备器制备培养基的操作要点:半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。
培养基的安全分装:无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。分装选项:制备和灭菌过的培养基可以通过一个软管进行分装。在每次灭菌进程中,内吸管和分装口也通过进入的蒸汽进行了灭菌。分装软管和连接到该软管的分装接头必须使用合适的蒸汽灭菌工艺预先灭菌,并且必须在无菌条件下连接到分装口。
无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。
培养基制备的九个步骤关注要点:步骤一:称取数量:用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量,然后用电子天平准确称取重量。步骤二:培养基溶化:将培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。步骤三:调培养基pH:虽然培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内,但如果配制的培养基不能要求,则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计,则可以使用pH计。步骤四:培养基过滤:如果对配制的培养基没有特殊要求,这一步可以省略。步骤五:培养基分装:准备好的培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器,分装试管量大采用自动分液器,分装试管量小,可以用漏斗分液。确定这批培养基的较终pH值。步骤六:培养基灭菌处理:分装完成的培养基应马上灭菌。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。中国台湾实验室培养基制备器
高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。河北Systec培养基制备器
全自动培养基制备器十分灵活——随时可以让你快速的灭菌制备高质量的培养基。这可以好大限度的减少用于储藏成品培养皿的空间,消除对培养皿储存的管理,保证高质量的培养基均一性。它能够迅速而温和的灭菌培养基并精确监控和控制灭菌过程中的时间、温度、压力等参数,从而保证其所有灭菌的产品都拥有同样的,其直观的图形界面及可编程功能能使每个人都能方便的操作这台仪器。培养基制备程序:Sampleprep可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅,“水套系统”里加入夹层水(灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导),加入培养基原料,准备启动灭菌程序。培养基可以直接在Sampleprep内悬浮溶解。强力磁力搅拌确保培养基在内腔里混合的均匀性,并防止凝结。培养基可以在灭菌前用WATERBATH(水浴)模式预先溶解。同时,直观的图形化界面使没有经过专门培训的人员也能方便的操作。用户可以自定义设置多达50个灭菌程序,比如灭菌温度、时间、分装温度等。它们可以被储存起来并随时调用。河北Systec培养基制备器
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