上海细胞转染试剂原理

基于阳离子聚合物的转染试剂，带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类，前者细胞毒性相对较大，后者细胞毒性较小，但其转染效率都高于脂质体转染，适用也较为广范。以上单一成分的转染试剂或聚焦于提高效率或着重于降低细胞毒性，可谓鱼和熊掌不可兼得也。新一代转染试剂，不局限于单一成分，混合了不同配方的脂类（非脂质体）、加上蛋白质组分、以及各种的成分，兼具了转染效率高和细胞毒性小的优势，且操作更加简单，易于高通量。采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。上海细胞转染试剂原理

图5.Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的siRNA在单次静脉注射后可在肝脏中引起剂量反应的敲低现象。Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的剂量进行注射。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平（Biophen显色检测）。持续敲低能力在单次注射后可观察到更长的敲低时间图6.使用三种不同浓度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究剂量效应。siRNA分子与Invivofectamine3.0试剂形成复合物后分别以1、0.5、及0.25mg/kg的剂量进行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清，并使用显色法对血清进行分析以确定FVII蛋白的敲低效果。低毒性上海核酸转染试剂报价细胞转染必备——高效低毒转染试剂.

转染48小时后，使用尼康荧光显微镜GFP荧光进行成像（左侧四幅图），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene6.带有6xHis标记的GFP荧光蛋白使用Ni-NTA亲和柱技术实现分离。5微升洗脱液载入SDS-PAGE凝胶电泳分离并进行Coomassie亮蓝染色（右上图E），道1为LipoD293293、道2为标准蛋白分子、道3为Xfect、道4为293fectin和道5为Fugene6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量（见右下图F）。产生慢***的比较通过LipoD293™试剂（升级版）和LipofectamineLTX（LTX）试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1微升（上图）和10微升（下图）。

对CHO细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和绿色荧光蛋白GFP的cDNA按照生产商的提供的转染步骤分别转染到CHO细胞。在转染24小时后，荧光素酶的活性使用Beckman公司的化学发光监测器测定；GFP阳性细胞率使用BD公司的FACS检测。左图：LipoD293试剂（升级版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的价格比较（美元/1000微升）。所有的价格是从生产制造商的网站上收集对CHO细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将编码荧用于基因编辑的RNP转染试剂.

用LipoFectMax™转染Hela细胞，左图转染GFPcDNA，右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白（GFP），转染24小时后观察转染效果，LipoFectMax™转染效率（左图）比LipoFectamine®2000（右图）高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作，通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.riboFECT CP转染试剂应用案例,可转染各种细胞,靠谱!常用转染试剂配方

正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。上海细胞转染试剂原理

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。上海细胞转染试剂原理

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