分离外泌体的方法之超滤：它使用孔径为50-450nm的膜过滤器从细胞碎片和较大的EV中分离外泌体。通过使用纳米尺寸的滤膜，可以分离出目标尺寸的外泌体。超滤法通常用作超速离心的后续步骤，以及凝胶过滤和色谱的较后一步。超滤可以通过切向流过滤（TFF）或直流过滤（DFF）方法进行处理。DFF方法也称为死端过滤，存在膜污染和颗粒分离受损的问题。此外，DFF只适用于小体积样品，例如高达30mL的样品。TFF也称为错流过滤是一种更快速、高效和方便的分离大规模外泌体体积的过程，TFF是样品流体切向流过滤膜并避免形成滤饼或堵塞的过程。外泌体的构成：外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。北京快速提取外泌体制造商
差速离心法分离外泌体的实验原理：外泌体是一种小的(40-100nm)细胞外膜囊泡，目前进行外泌体分离的普遍方法是差速离心法。应用差速离心法和粒径分析等是细胞外囊泡(EV)研究的重要步骤。已知细胞会分泌许多膜囊泡，这些囊泡的大小、分子含量及其形成机制各不相同具体取决于细胞的类型和当前状态。通常可以辨别出三个主要的EV群体：凋亡小体、脱落的囊泡和外泌体.凋亡小体是已知较大的囊泡，直径为800-5000nm，由凋亡后细胞的细胞质和质膜成分组成。脱落的囊泡和外泌体由非凋亡细胞释放。脱落的囊泡，也称为“胞外体”或有时称为“微泡”，是由质膜起泡产生的，一般的粒径尺寸范围为(50–1000nm)。北京快速提取外泌体制造商可将不同分离方法结合使用，以提高外泌体分离的效率和分离精度。
细胞外泌体的来源和表征方法：细胞外泌体是直径为30-150nm的血管外囊泡亚群。在过去的20年里，科学家已经从包括正常细胞和病细胞在内的许多细胞类型中分离出外泌体，并且研究了它们对其他细胞的影响。外泌体是由多种大分子组成，例如核酸、蛋白质和脂质。细胞外泌体具有天然的特定细胞靶向特性，通常被设计用于靶向大分子（DNA和RNA）和药物递送系统（多柔比星、紫杉醇和紫杉醇）。目前常用细胞外泌体的分离方法主要是超速离心法、密度梯度离心法、超滤分离法、基于聚合物的沉淀法、亲和沉淀分离法、免疫磁珠法和色谱法等。
外泌体分离方法之尺寸排阻色谱分离法：尺寸排阻色谱(SEC)用于根据尺寸而非分子量分离大分子。该技术应用了一种填充有多孔聚合物珠子的柱子，该珠子含有多个孔和隧道。分子根据它们的直径穿过珠子。小半径分子通过色谱柱的孔迁移需要更长的时间，而大分子从色谱柱中洗脱得较早。尺寸排阻色谱可以精确分离大分子和小分子。此外，该方法可以应用不同的洗脱溶液。与离心机离心方法相比，色谱分离具有较多的优势，因为通过色谱分离的外泌体不受剪切力的影响，避免了因剪切力所造成的囊泡结构改变。目前，SEC是一种普遍接受的分离血液和尿液中存在的外泌体的技术。此外，SEC方法与超滤相结合已用于分离和分析尿源性外泌体。此外，流场-流分馏结合紫外分析仪和光散射检测器已被应用于分析外泌体的大小和纯度。流场-流分馏结合抛物线和交叉流来分离外泌体。获得的外泌体已通过电子显微镜和质谱检测。外泌体的高纯度分离是外泌体研究的基础。
外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体头次于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。优化外泌体分离方法可以提高分离效率和分离精度。天津血浆外泌体公司
外泌体分离的过程需要进行多次洗涤和离心。北京快速提取外泌体制造商
分离外泌体的方法之降水：它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在益处。该方法首先利用DL-二硫苏糖醇溶液还原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合网络，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可实现外泌体的沉淀。还有利用聚合物沉淀方法并消除超速离心的商业试剂盒。ExoQuick™、Exo-spin™是来自Invitrogen™和miRCURY™的市售总外泌体分离试剂。北京快速提取外泌体制造商
