反转录酶的用处：由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。通常情况下，细胞内的转录应由DNA到RNA的，所得RNA为信使RNA（mRNA）供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中，要实现自身扩增，必须具有DNA，因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用RT—PCR，将RNA转变为DNA后扩增，以获得RNA的序列。1970年从致死RNA病毒中发现了反转录酶，并认为此酶与病毒的致死性质有关。反转录酶也分布于某些正常细胞和胚胎细胞。反转录酶的发现表明不能把生物的遗传信息由DNA→mRNA→蛋白质非常化，遗传信息也可以从RNA传递到DNA。它促进了分子生物学、生物化学和病毒学的研究，已成为研究这些学科的有力工具。逆转录技术应用于人类基因组的研究。重庆miQP2逆转录稳定性高
miRNA逆转录茎环法：首先需要进行RNA样品制备，可选的方法有：离心柱法抽提（不必去除gDNA）；传统Trizol法抽提（需要去除gDNA）。miRNA正向引物：需要分别设计。是否采用通用引物视情况而定，正向引物与通用反向引物不会形成二聚体时才能用。取200ul的PCR管，根据所得每组RNA的浓度C，每孔加入1000ng总RNA，按公式1000ng/C计算出所需RNA的体积x。然后按建议的20μL反应体系说明，依次向200μL的PCR管内加入下列试剂：加样结束后，移液器吹打混匀，低速离心数秒。将逆转录PCR管放入PCR扩增仪内，调整参数：37℃15min（反转录反应），85℃5s（反转录酶的失活反应），4℃∞。反应结束后根据实验需要进行荧光定量PCR或放入-20℃冰箱保存。说明：此处可以选择U6下游引物作为U6的逆转录引物，注意相应地调整无酶水的体积和反应温度。重庆miQP2逆转录稳定性高逆转录实验过程中避免光照，防止RNA样品和试剂受光降解或刺激。
茎环法逆转录是一种逆转录反应的技术，它利用茎环结构的RNA分子作为反向引物，在逆转录过程中特异性地扩增目标RNA分子。该技术在分子生物学和医学研究中得到了普遍的应用，特别是在RNA的研究和检测中具有独特的优势。茎环法逆转录技术的基本原理是利用逆转录酶和茎环结构的RNA作为反向引物，将RNA逆转录成cDNA，并在PCR反应中扩增。茎环结构的RNA分子具有较高的稳定性和特异性，可以特异性地识别和结合目标RNA分子，从而在逆转录反应中作为反向引物扩增目标cDNA。此外，由于茎环结构的RNA分子与目标RNA分子的碱基序列互补，因此茎环法逆转录技术可以避免随机引物引起的非特异扩增。
多逆转录酶都具有多种酶活性，DNA指导的DNA聚合酶活性；以反转录合成的首先条DNA单链为模板，以dNTP为底物，再合成第二条DNA分子。除此之外，有些反转录酶还有DNA内切酶活性，这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用，目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板，在反转录酶的作用下，合成出互补的DNA(cDNA)，由此可构建出cDNA文库(cDNalibrary)，从中筛选特异的目的基因，这是在基因工程技术中较常用的获得目的基因的方法。逆转录过程是病毒的复制形式之一，如RNA病毒中的逆转录病毒。
逆转录PCR的用途普遍，可用于分析基因的转录产物、检测细胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探针、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在临床上RT-PCR可以用于遗传病诊断、病症检测、检测病人标本中的RNA病毒，如HAV、HCR、HIV等。在植物方面RT-PCR常用于研究环境胁迫对植物基因表达的影响，以及在特定的环境或生长阶段中植物体不同部位基因表达的差异性。使用RT-PCR检测分析RNA转录产物具有以下突出的优点：理论上可以检测几乎任何基因的转录产物；可以实现极为微量RNA样品（ng级别）的检测；样品耐受性好，未经纯化的粗制生物样品也可以用于检测。逆转录活性可以RNA为模板，合成与其序列互补的DNA链，生成DNA-RNA杂合双链。苏州彩色逆转录企业
逆转录实验中的RNA样品处理时要避免使用酸性物质、有机溶剂和酶切酶剂。重庆miQP2逆转录稳定性高
虽然茎环法逆转录技术在分子生物学和医学研究中具有普遍的应用，但在实际应用中还存在一些挑战。例如，茎环结构的RNA分子需要经过复杂的化学合成和纯化过程，从而增加了技术的难度和成本。此外，茎环法逆转录技术也面临着样品污染、PCR反应中的非特异扩增等问题，需要在实验设计和数据分析中进行有效的控制和纠正。总之，茎环法逆转录技术是一种重要的分子生物学技术，它具有特异性高、全长扩增、无需RNA纯化等优点，在RNA的研究和检测中得到了普遍的应用。随着分子生物学和医学研究的不断发展，茎环法逆转录技术的应用范围也会不断扩展，并为科研和临床诊断提供更多的技术支持。重庆miQP2逆转录稳定性高
