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    不过，这些核糖体的基本结构和功能一致。[2]核酶科学家在研究RNA的转录后加工时发现某些RNA有催化活性，可以催化RNA的剪接，这些由活细胞合成、起催化作用的RNA称为核酶。许多核酶的底物也是RNA，甚至就是其自身，其催化反应也具有专一性。[2]已经阐明的天然核酶有锤头状核酶、发夹状核酶、I型内含子、Ⅱ型内含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基转移酶等。如何评价核酶的理论意义与实际意义，如何看待核酶与传统意义上的酶在代谢中的地位，都有待进一步研究。[2]1.核酶发现核酶更早由Cech和Altman（1989年诺贝尔化学奖获得者）发现。1967年，Woese、Crick与Orgel等基于RNA二级结构的复杂程度提出其可能有催化活性；1982年，Cech在研究四膜虫rRNA前体剪接时发现其内含子有自我剪接活性；1983年，Altman在研究细菌tRNA前体时发现核糖核酸酶P中的MRNA参与tRNA前体转录后加工；1982年，Kruger等建议将有催化活性的RNA命名为“ribozyme（核酶）”。

    轻轻吹3-5次混匀。B.轻轻混匀转染试剂，用50ulOpti-MEM稀释lipofectamineTM2000,轻轻吹3-5次混匀，室温下静置5min。C.混合转染试剂和siRNA稀释液，轻轻吹3-5次混匀，室温下静置20min。D.转染复合物加入到24孔细胞板中，100ul/孔，前后轻摇细胞板混合均匀。E.细胞板置于37℃、5%CO2培养箱中培养18-48h。转染4-6h后可更换新鲜培养基。3）效果检测：转染完成后24-72h均可进行siRNA沉默效果检测，更佳检测时间与细胞类型，转染试剂，检测目的等相关。1）RNA水平的检测：mRNA是检测siRNA沉默效率的更佳指标，siRNA转染后24-72h即可检测到靶基因mRNA表达明显降低，检测方法是RealtimePCR。2）蛋白水平的检测：检测方法是Westernblot。3）功能筛选：应用EdU细胞增殖、EdUTP细胞凋亡等方法进行细胞功能筛选。动物实验修饰方法：由于动物实验对siRNA稳定性的要求较高，尽管未修饰的siRNA也可以进行动物实验，但是以CHol,OMe,PS修饰的siRNA效果较好。给***法：局部给药：更直接的导入方式，siRNA的导入效率高，用量少。siRNA能很快被吸收。适用于浅表***和组织，包括眼，肌肉和皮下组织等。2表2：使用lipofectamineTM2000转染siRNA产品参考用量细胞培养容器表面积。南京地区做RNA检测哪家便宜？

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