通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学，例如Bright-Glo™、Steady-Glo®和Dual-Glo®允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理，并实现了在非常高通量的应用中使用报告基因检测。[1]随着UltraGlo™萤光素酶的发展，现在已经实现了“加样-读数”的ATP检测方法。ATP是细胞健康的重要指标，这使得CellTiter-Glo®能有效测定细胞活力，尤其是在高通量应用中。该检测原理还促进了其它ATP检测平台的诞生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo®（2004年）和ADP-Glo™（2009年）酶检测系统。[1]2...

包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素（游离酸），D-荧光素盐（钠盐和钾盐）。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO；后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏...

5）对于检测灵敏度要求特别高的实验，建议使用新鲜配制的本产品。6）在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8）本产品只作科研用途！荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中更有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶，分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase，同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（Gausslu...

在食品卫生领域由于ATP生物发光技术无需培养过程，操作简便、灵敏度高，数分钟内可得到结果，具有其它微生物检测方法无法比拟的优势，是目前检测微生物更快的方法。荧光素是更受欢迎的多功能生物荧光底物之一。在萤火虫和几种其它甲虫中发现了萤火虫荧光酶/荧光素。通过中间体dioxetanone介导作用，荧光素酶氧化ATPji活的荧光素。萤火虫荧光素酶在ATP的辅助下氧化荧光素产生荧光。这个反应发生的几秒内在560nm处的化学荧光达到更高峰，当荧光素和ATP都超量存在的条件下，发射光与荧光素酶的活性成比例关系。萤火虫荧光素酶很早以前就用于与抗体结合形成偶联物，作为免疫分析中用荧光素作为底物进行检测的...

但是上一次底物的残留曲线可以知道，可以控制对下一次观察结果的影响。储存与运输一般放在-20℃的冰箱即可，半年以上不使用放在-80℃的冰箱，溶解配制后放在4℃冰箱，短期运输放在4℃环境。建议现用现配，D荧光素钾盐在液体中容易降解。应用领域肿大的瘤，干细胞，药物开发，基因治的好，转基因小鼠，免疫学等等。英文名字firefly.中文名称荧光素酶，重组荧光素货号AAT-12500规格￥1430/1mL背景资料：荧光素酶是来自北美萤火虫（Photinuspyralis）中荧光素酶基因的克隆和重组表达，它为实验研究或者用生物荧光试剂制备试剂盒检测ATP或者荧光素底物提供了可信度和可靠性。这种重组酶...

荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶，分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase，同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（Gaussluciferase）。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用...

或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而...

tetrametrylrhodarnineisothiocyante，TRITC）是一种紫红色粉末，较稳定，是罗达明（rhodamine）的衍生物。更大吸收光谱550urn，更大发射光谱620urn呈橙红色荧光，与FITC发射的黄绿色荧光对比鲜明，常用于双标记染色。按照抗原抗体反应的结合步聚，免疫荧光法可分为以下三种。1．直接法用荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合，以检查出相应的抗原成分。2．间接法先用特异性抗体与相应的抗原结合，洗去未结合的抗体，再用荧光素标记的抗特异性抗体（间接荧光抗体）与特异性抗体相结合，形成抗原一特异性抗体一间接荧光抗体的复合物。在此复合物上带有比直接法...

具体实验流程：注：该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性，不适用于对细菌荧光素酶进行检测。1．实验***天，消化并接种细胞（根据具体实验选择合适的细胞）于35mm细胞培养皿，置于5％CO2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。2．等细胞密度达到70％时用Luciferase报告基因质粒、LacZ的表达质粒及其它质粒（根据具体实验确定）共转染细胞（根据具体实验选择转染方法，如磷酸钙沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可）。3．转染24－36h后，吸取培养液，用预冷的PBS（无钙和镁离子）洗涤细胞。注：荧光酶的酶促反应会被痕量的钙所抑制...

普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内活ti成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。萤光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的萤光素酶，萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期，这一现象被认为是发展生物分析的有力平台。1991年，Promega发布了di一代萤光素酶分析产品，并启动了基于萤光素酶的进一步创新计划，通过持续致力于...

就可以用高敏感度的CCD相机对动物体内进行***观察而不会伤害到动物本身。在萤光素酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括***在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，萤光素酶已经被用于商业化的次世代焦磷酸定序技术，借由dNTP接上DNA链时水解放出的焦磷酸，透过另外一个硫酸盐腺甘酸转移酶反应，萤光素酶能将产物ATP与萤光素转化为冷光，机器借此探测光线并定序。萤光素酶也可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可以用含有萤光素酶的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用萤光素酶的发光来...

每孔加入100μl养24h后，Luciferin使其终浓度为150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活题成像系统检测，分析发光强度与细胞数之间的相关性。4)细胞生长曲线绘制MCF7-luc细胞和作为对照取表达荧光素酶的MCF-7细胞，接种于24孔板，接种密度为2×104/孔。细胞接种后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔细胞，用细胞计数仪测定细胞数。以细胞生长天数为横坐标，细胞数目为纵坐标，分别绘制两种细胞生长曲线。二．动物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周龄，体重（15±2）g，雌雄各3只。取对数生长期的MCF-7用PBS重悬为2．5×10/...

按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）、萤光素钾盐只是不同别名，以CAS号115144-35-9为准。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽...

可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。c.验证特定转录因子同其调控序列的作用，将该序列（通常为启动子区域）插入报告基因载体，同时在实验细胞***转过表达该转录因子，可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。d.可以分析信号通路是否***，将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体，在不同上游信号条件下，荧光素酶活性**了通路的下游响应。例如在GPCR研究中，将cAMPresponseelement（CRE）载入报告基因载体，构建稳定表达细胞株后，可以用于分析GPRC的***与6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd筛选。又如，将HIF1α的响应原件hypoxia-r...

可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点：①非放射性；②比CAT及其他报告基因速度快；③比CAT灵敏100倍；④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时，在植物中的半衰期为3．5小时。由于半衰期短，故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变，而荧光素酶不会积累。相反，CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范围内，荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下，可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤：1．用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2．...

我们将与LgBiT具有极强亲和作用的。HiBiT作为一种易于检测且具有高灵敏度的蛋白质标签，具有多种功能，例如当与基于CRIPSR的标签一起使用时，可以创建内源性报告基因模型。[1]2020Lumit™技术随着NanoBiT®技术的发展，人们认识到可以利用该系统通过结合免疫测定的组分检测多种分析物。由此产生的平台（现称为“Lumit”）提供了具有高灵敏度的简化免疫检测法。萤光素酶（英语：Luciferase）是自然界中能够产生生物发光的酶的统称，其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况...

后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵...

8．取剩余裂解液测定LacZ的活性，其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图，分析数据。注：荧光素见光易氧化，已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项：1．荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应，而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时，加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2．如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测，样品可以在冰上保存大约5h，在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3．利用上述方法检测冷的样品时，其信号强度将下降5-15%。4．在荧光素酶活性较高的情况下，导致信号超出线性范围（信号溢出）可用裂解液将样品进行稀释...

荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成荧光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段，可以对整个动物体中的细胞群落进行分析：将不同类型的细胞（骨髓干细胞、T细胞等）标记上（即表达）荧光素酶，就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活ti观察而不会伤害到动物本身。在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如荧光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括影响在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，荧光素酶可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可...

是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc®萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验，研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因，即NanoLuc®萤光素酶。这是一种小分子（19kDa）单体酶，具有独特的底物，其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着范围广的应用前景，为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET™技术NanoLuc®的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移（BRET）的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现，红色...

萤光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的萤光素酶，萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期，这一现象被认为是发展生物分析的有力平台。1991年，Promega发布了***代萤光素酶分析产品，并启动了基于萤光素酶的进一步创新计划，通过持续致力于研究和创新生物发光系统建立了各种不同的分析技术。Promega萤光素酶技术发光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月...

而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种，而叩甲总科（包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫）则有更多，因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫（Photinuspyralis）。荧光素酶报告基因（Luc）是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶，哺乳细胞...

2）按10μL/g体重的浓度向每支小鼠注射相应量的15mg/mL荧光素溶液；3）腹腔注射10-15min后进行成像分析。（对每只动物模型做荧光素动力学研究以确定峰值信号获取时间）Firefly,freeacid/D-萤火虫荧光素分子式：C11H8N2O3S2分子量：g/mol外观：白色至浅黄色粉末溶解：，形成近乎无色至浅黄色的清夜保存：-15°C避光应用：1）活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；2）***用于报告基因分析，免疫分析和ATP荧光卫生监测分析D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种...

luciferyladenylate）+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为热能而被浪费。分析荧光素或荧光素酶不是特定的分子，而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusoleariu'）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧...

luciferyladenylate）+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为热能而被浪费。分析荧光素或荧光素酶不是特定的分子，而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusoleariu'）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧...

luciferyladenylate）+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为热能而被浪费。分析荧光素或荧光素酶不是特定的分子，而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusoleariu'）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧...

荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常常可以进一步加速反应（与肌肉收缩的情况相...

就可以用高敏感度的CCD相机对动物体内进行***观察而不会伤害到动物本身。在萤光素酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括***在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，萤光素酶已经被用于商业化的次世代焦磷酸定序技术，借由dNTP接上DNA链时水解放出的焦磷酸，透过另外一个硫酸盐腺甘酸转移酶反应，萤光素酶能将产物ATP与萤光素转化为冷光，机器借此探测光线并定序。萤光素酶也可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可以用含有萤光素酶的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用萤光素酶的发光来...

从而实时监测疾病发展状态或药物的***功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。,PotassiumSalt/D-荧光素钾盐分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol纯度：高级纯（）应用：1）活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；2）***用于报告基因分析，免疫分析和ATP荧光卫生监测分析；Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1）配制成100mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2...

而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种，而叩甲总科（包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫）则有更多，因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫（Photinuspyralis）。荧光素酶报告基因（Luc）是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶，哺乳细胞...